大豆根瘤菌调渗基因及其调控的研究

提取耐盐的快生大豆根瘤菌RT19的总DNA，用EcoRI酶切，将其DAN片段与质粒连接，构建该菌的基因文库。通过三亲本杂交，将文库转移至盐敏感突变株，在含有盐和抗生素的基本培养基上筛选耐盐的阳性克隆，首次分离到与耐盐性有关的NDA片段，其长度为15-30kb,正在进行亚克隆。采用盐激方法，研究该菌的渗透调控机制，在其对数生长后期，突然加入高浓度NaCl，处理若干分钟，测定细胞内游离氨基配含量，并用聚丙烯酰胺凝胶双向电沪测其特异性蛋白。发现该菌在高盐冲击下细胞内除积累谷氨酸外，还积累脯氨酸，而且细胞内出现两种盐激蛋白。本研究有助于提高快生大豆根瘤菌耐盐和抗旱能力，增强其在土壤中的存活能力，而且对农作物耐盐性状的改造具有重要的意义。