肠出血性大肠杆菌O157:H7紧密粘附素胞外区与其受体结合片段复合物的晶体结构解析及功能研究

肠出血性大肠杆菌 O157:H7作为重要的人畜共患传染病原，已成为全球性的公共卫生问题，阐明其致病机理对提高由该菌引起的暴发流行、生物恐怖的预防和处理能力具有重要的理论指导意义。病原微生物与宿主的相互作用是决定感染与发病的关键，该菌通过III型分泌系统将紧密粘附素(Intimin)的受体（Tir)整合至宿主细胞膜上，与Intimin结合介导其在体内的定植、信号转导，导致宿主细胞的粘附擦拭损伤。解析Intimin-Tir结合片段复合物的结构有助揭示O157粘附定植的分子机制，据此发现高效特异的疫苗抗原表位和新的药物作用靶点。本课题拟表达纯化复性的IntiminC、Tir-IBD，制备复合物，对之进行晶体培养、X线衍射和结构解析，进一步分析结合表位与药物作用靶点，并采用定点突变和同源重组技术构建其突变体和突变菌株，通过体外结合、细胞粘附和动物实验进行验证，为寻找O157有效的防治方法提供线索。