MicroRNAs调控CCL18促乳腺癌EMT的研究

The tumor metastasis is the main reason for treatment failure of breast carcinoma.Preventing from the tumor metastasis is the key point for us to improve of curative effect of breast cancer.In tumor microenvironment, our study has demonstrated that CCL18 secreted by tumor associated macrophages (TAM),promotes invasion and migration of breast cancer via its membrane receptor,PITPNM3.Our further study has proved that CCL18 promotes epithelial to mesenchymal transition(EMT) of the breast cancer cells through activating the EMT signal pathway. MicoRNAs regulate the biologic functions of tumor, but it has not been clarificated that the microRNAs regulate breast cancer EMT induced by CCL18. In this study, we will demostrate that CCL18 activates the signal factors and transcriptional factors through the EMT signal pathway to regulate the expression of the microRNAs involved in CCL18 functions, and CCL18-microRNAs target the EMT signal pathway,to sustain the activation of the EMT signal,to regulate EMT and metastasis of breast cancer. In breast cancer tissues, we will demostrate that CCL18-microRNAs regulate breast cancer EMT, corelated with the prognosis and metastasis of breast cancer. Our study will provide new treatment targets to prevent from breast cancer metastasis, and develop new way of breast cancer treatment.

肿瘤浸润迁移是乳腺癌治疗失败的根本原因，抑制肿瘤迁移是提高乳腺癌疗效的关键。课题组前期研究证明肿瘤微环境中TAM来源的CCL18通过其受体PITPNM3促进乳腺癌浸润迁移。进一步研究证明CCL18激活乳腺癌上皮间质转化（EMT）信号通路，促进肿瘤EMT。MicroRNAs调控肿瘤多种生物学功能,但microRNAs对CCL18促乳腺癌EMT的调控作用还未阐明。本课题将研究CCL18激活的乳腺癌EMT信号通路通过激活其它信号分子、转录因子调控CCL18相关microRNAs的表达；CCL18相关microRNAs靶向乳腺癌EMT信号通路，维持EMT信号通路激活，调控CCL18促乳腺癌EMT，调控乳腺癌浸润、迁移。在乳腺癌组织中，证明CCL18相关microRNAs调控乳腺癌EMT，与肿瘤的预后、转移相关。为抑制乳腺癌转移提供新的治疗靶点，开辟乳腺癌治疗新途径。

课题已经按照原定计划全面完成，研究了CCL18在促进乳腺癌EMT的过程中，调控乳腺癌细胞中相关microRNAs的变化以及作用机制。在不影响课题整体创新和确保工作量的前提下，对部分研究内容进行了调整。. 我们之前的研究已经证明肿瘤相关巨噬细胞（TAM）来源的CCL18促进乳腺癌的转移，但在此过程中，microRNAs是否参与并不清楚。在此基础上我们进行了本课题的相关研究。得到5个重要的结论：①TAM来源CCL18下调 miR98和miR27b的表达；②CCL18通过N-Ras/ERK/PI3K/NFκB/Lin28b信号通路，在转录后水平下调 miR98表达；③下调 的miR98和miR27b分别靶向N-Ras和Lin28b，通过正反馈方式，维持CCL18对信号通路的激活作用；④下调 miR98和miR27b有利于促进CCL18介导的乳腺癌细胞上皮间质转化（EMT）和浸润迁移；⑤体内实验证明，miR98下调有利于CCL18介导的乳癌细胞转移。课题系统研究了在CCL18促乳腺癌EMT过程中，miR98和miR27b发挥了重要作用，阐明了两个microRNAs的作用机制。该研究为提高抗癌疗效提供了新的靶点。在完成上述研究的同时我们还在三个研究方向上取得重要进展，在CCL18促进迁移性乳腺癌干细胞样细胞（BCSLCs）生成方向证明：①在乳癌组织、细胞培养中证明CCL18促进迁移的乳腺癌细胞发生EMT的过程中产生BCSLCs。②沉默CCL18受体PITPNM3可抑制乳癌细胞EMT和BCSLCs的生成。③沉默CCL18信号通路上的关键分子snail，可抑制CCL18促乳腺癌细胞EMT和BCSLCs的生成。④在动物实验中证明沉默snail可以抑制CCL18促进乳腺癌迁移；在CCL18通过促肝癌细胞表达IV型胶原方向证明：①转移性肝癌组织中CCL18的表达高于非转移性肝癌，肝癌中CD68表达升高的同时CCL18表达升高。②沉默CCL18的受体PITPNM3可抑制肝癌粘附、侵袭、迁移。③用表达IV型胶原的慢病毒载体感染肝癌细胞，可促进肝癌粘附、侵袭、迁移。在胶质瘤微环境对胶质瘤作用的方向证明：TAM与FMRP促胶质瘤增殖相关。上述研究产生大量数据，已经发表影响因子5分以上的SCI文章2篇，其中CCL18促进BCSLCs生成、促肝癌表达胶原两个方向准备发表文章。