肝细胞核因子4alpha调控骨髓间充质干细胞的肝内分化

在骨髓间充质干细胞（MSCs）肝内分化为肝样细胞或肝细胞的过程中，存在分化效率低，生理功能不足以及潜在恶性转化等问题。肝细胞核因子4alpha（HNF4alpha）是肝脏发育成熟所必需的一种转录因子，对维持肝脏特异性功能基因的表达和肝细胞的良性表型起重要作用。本课题组在已建立的MSCs活体分子成像技术平台上，利用绿色荧光蛋白（hrGFP）和荧光素酶（Rluc）基因作为报告基因，通过构建慢病毒载体pLenti6.3/V5-hrGFP-HNF4alpha-IRES-Rluc使MSCs稳定过表达HNF4alpha并移植受损肝脏，以达到活体上监测HNF4alpha促进MSCs向成熟肝细胞分化并修复肝脏的预期目标，为慢性肝病的干细胞移植及其诱导调控监测寻找客观证据。

肝细胞核因子4alpha（HNF4alpha）是肝脏发育成熟所必需的一种转录因子，对维持肝脏特异性功能基因的表达和肝细胞的良性表型起重要作用。本课题组在掌握活体MSCs生长分化及转归的光学基因成像示踪评价体系的基础上，成功构建pLenti6.3/V5-HNF4alpha-GFP慢病毒过表达体系，并成功构建HNF4a 过表达MSCs细胞系，以MSCs为对照，进行体外分化实验。实验结果表明，HNF4a-MSCs分化效率增加。其分化后肝样细胞具有尿素代谢、糖原储存、白蛋白分泌、ICG吞噬及清除等肝脏细胞功能。HNF4a-MSCs在NOD-SCID小鼠肝内原位移植后，通过免疫组化可以检测到移植的HNF4a-MSCs表达白蛋白。MSCs移植小鼠未能检测到白蛋白。