EAMG大鼠HPA轴-免疫相关性及补脾强力复方干预作用的实验研究

Myasthenia gravis (MG) is the involvement of the autoimmune neuromuscular joint nerve disease, its pathogenesis is not only involved in the immune system itself, also influence each other pathology and HPA axis and immune system are closely related, so the treatment should be aimed at the HPA axis - the immune system a comprehensive intervention. This topic on the basis of previous research, the HPA axis - the immune system as the research target, with the strength compound BuPi qiangli Chinese herbal mediicine in intervention factors, removal of the adrenal HPA axis damage, regular copy EAMG rats models, observed between groups rats thymus COR receptor genes and immune groups such as COR receptor protein expression, tissue pathological changes, and immunoglobulin content in the blood, AchR - Ab and cytokine levels, objectively reveal the HPA axis damage effect of the immune system of EAMG rats; Detection of EAMG rats cytokines and their receptors expression of HPA axis, HPA axis pathological changes, the blood level of ACTH, COR, the hypothalamus CRH levels, observation of EAMG rats with abnormal immune system effect on the HPA axis; At the same time observation of compound BuPi qiangli Chinese herbai medicine intervention effect. Through research to clarify the occurrence and development of MG and HPA axis - the immune system pathologically influence each other closely, and further to reveal the modern mechanism of compound BuPi qiangli Chinese herbal medicine treatment of MG.

重症肌无力(MG)是累及神经肌肉接头的自身免疫神经疾病，其发病不仅涉及免疫系统本身，还与HPA轴和免疫系统病理上相互影响密切相关，故治疗应针对HPA轴-免疫系进行综合干预。本课题在前期研究基础上，以HPA轴-免疫系为研究靶点，以补脾强力复方为干预因素，摘除肾上腺致HPA轴损伤，常规复制EAMG大鼠模型，观察各组大鼠胸腺等免疫组织COR受体基因与COR受体蛋白表达情况、组织病理改变，及血中免疫球蛋白、AchR-Ab及细胞因子水平，客观揭示HPA轴损伤对EAMG大鼠免疫系统的影响； 检测EAMG大鼠HPA轴细胞因子及其受体表达情况，HPA轴病理改变，血中 ACTH、COR水平，下丘脑CRH水平，观察EAMG大鼠免疫系统异常对HPA轴的影响；同时观察补脾强力复方的干预作用。 通过研究力图阐明MG的发生发展与HPA轴-免疫系统病理上的相互影响紧密联系，并进一步揭示补脾强力复方治疗MG的现代机制。

本研究首先在理论上提出“五脏亏虚，因虚生毒”是重症肌无力（MG）发病的基础,益气扶阳解毒为本病治疗大法，并对补脾强力复方及其加减方进行临床观察。实验研究方面，首先观察了EAMG大鼠免疫功能紊乱对HPA轴的影响及补脾强力复方干预作用，结果显示：（1）EAMG大鼠出现免疫异常的同时，还存在血清ACTH、CRH水平升高、E水平降低及下丘脑、垂体、肾上腺的病理异常；（2）补脾强力复方能增加EAMG大鼠体重、降低Lennon评分及其血清AchR-Ab量；能降低血清IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17含量，升高TGF-β表达，纠正其细胞因子网络失衡状态；能干预细胞因子及其受体信号传导通路，影响EAMG大鼠下丘脑CRH表达；能降低血清ACTH、CRH水平、升高血清E水平，并减少EAMG大鼠胸腺细胞滤泡性增生、生发中心形成，减轻HPA轴病理损伤。上述研究初步表明，EAMG大鼠免疫系统紊乱导致HPA轴一定程度的功能和结构改变，补脾强力复方既能调节EAMG大鼠的免疫异常，又对HPA轴功能和结构损伤有一定治疗作用。 其次，通过摘除Lewis大鼠双侧肾上腺再制作EAMG模型，观察HPA轴损伤对MG发病的影响及补脾强力复方的干预作用。结果显示：（1）摘除Lewis大鼠双侧肾上腺可致HPA轴形态及功能异常，增加EAMG易感性，加重EAMG症状；（2）补脾强力复方可降低模型鼠Lennon评分；降低其血清AchR-Ab、IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL17水平，升高血清皮质醇浓度、IL4、TGF-β水平及下丘脑bcl-2蛋白表达，降低丘脑bax蛋白表达；升高模型鼠胸腺、脾脏、气管等组织GRmRNA及蛋白表达；初步表明补脾强力复方对HPA轴损伤有潜在改善效应，对HPA轴损伤后EAMG大鼠免疫异常以及免疫组织的变化有较好治疗作用。综合上述，MG发生发展与HPA轴-免疫系的相互作用、相互影响密切相关，补脾强力复方可纠正HPA轴-免疫系的失衡状态，这可能是其治疗MG的重要机制。 本研究为该方的进一步研究提供了理论和实验依据。通过本课题研究培养人才13人，其中教师5人，硕士研究生8人；完成科研学术论文17篇，硕士毕业论文4篇。