Sigma-1R在N-3多不饱和脂肪酸治疗非酒精性脂肪性肝病中的作用及机制研究

The next ten years, our country will change from "hepatitis viral country" to "fatty liver disease country". The research of drug is large significant for prevention and treatment of fatty liver. Our previous studies showed n-3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFAs) could significantly decrease the nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) patients with lipid, cholesterol levels, but the mechanism is still not clear. The sigma-1 receptor is the major carrier protein in the endoplasmic reticulum and also is a variety of therapeutic targets for disease. We found sigma-1R activity decreased is closely related to NAFLD formation in NAFLD model. The latest report that sigma-1R have n-3 PUFAs binding sites, thus, we hypothesized that n-3 PUFAs may activate Sigma-1R treatment NAFLD. This project aims to build n-3 PUFAs treatment NAFLD time effect model, using molecular biological methods, from whole animal, cell and molecular levels of n-3 PUFAs via activation of Sigma-1R in the treatment of the molecular mechanism of NAFLD. The results will provide the n-3 PUFAs used in NAFLD treatment with scientific basis.

未来十年，我国将由"病毒性肝炎大国"转为"脂肪性肝病大国"，研究新型药物对于脂肪性肝病的防治具有现实意义。我们前期研究发现n-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFAs）可显著改善非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者血脂、胆固醇水平，但具体机制尚不明确。Sigma-1受体是内质网中主要的载体蛋白，是多种疾病的治疗靶点。我们发现在NAFLD动物和细胞模型中Sigma-1R活性降低与 NAFLD的形成密切相关。最新报道，Sigma-1R存在n-3 PUFAs的结合位点，由此，我们推测n-3 PUFAs可能激活Sigma-1R治疗NAFLD。本项目拟建立n-3 PUFAs治疗NAFLD的时-效模型，利用分子生物学方法，从整体动物、细胞和分子水平探讨n-3 PUFAs通过激活Sigma-1R治疗NAFLD的分子机制，研究结果将为n-3 PUFAs应用于NAFLD治疗提供科学依据。

背景.未来十年，我国将由“病毒性肝炎大国”转为“脂肪性肝病大国”，研究新型药物对于脂肪性肝病的防治具有现实意义。我们前期研究发现n-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFAs）可显著改善非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠血脂、胆固醇水平，但具体机制尚不明确。Sigma-1受体是内质网中主要的载体蛋白，是多种疾病的治疗靶点。我们发现在NAFLD动物和细胞模型中Sigma-1R活性降低与 NAFLD的形成密切相关。最新报道，Sigma-1R存在n-3 PUFAs的结合位点，由此，我们推测n-3 PUFAs可能激活Sigma-1R治疗NAFLD。.研究内容：.本研究拟建立n-3 PUFAs治疗NAFLD肝细胞的时-效模型，利用RT-PCR、RNA干扰等技术手段，从整体动物、细胞和分子水平全面探讨Sigma-1R在n-3 PUFAs治疗NAFLD中的分子机制，重点关注n-3 PUFAs与Sigma-1R的结合活性以及n-3 PUFAs对Sigma-1R的影响。.重要结果.1.成功建立n-3 PUFAs治疗NAFLD动物和细胞模型，进一步明确n-3 PUFAs对NAFLD的治疗作用。.2.按照计划应检测N-3 PUFA与Sigma-1R 结合情况，进过反复试验，均未得到阳性结果； 同时在动物实验中意外发现NAFLD组大鼠出现了2例睾丸明显缩小的现象，于是进一步检测三组大鼠的睾丸的平均重量，发现NAFLD组睾丸平均重量显著低于对照组，于是，我们调整研究方向，推测NAFLD可能影响雄性大鼠的生殖功能。.3. 证实NAFLD 影响睾丸形态学和间质细胞功能，但不影响雄鼠的生育能力和F1代生长发育。 N-3 PUFAs 治疗4周后，对NAFLD大鼠的生殖损伤有一定的保护作用，表现在血清激素水平、病理和精子质量方面。.4. 揭示NAFLD是通过降低血清中LH的水平，减少LH与LHR的结合，进而影响AC-cAMP通路，导致睾酮合成酶基因转录和表达水平降低。.5. 通过人群研究发现重庆市男性NAFLD患者的生殖功能存在一定程度的下降，表现在性激素水平和精子质量，为临床采取干预措施提供依据。.研究意义：.（1）进一步验证了n-3 PUFAs对NAFLD的治疗作用；（2）为进一步研究n-3 PUFAs应用于NAFLD人群的治疗提供科学依据。（3）本研究结果显示NAFLD对男性生