骨髓间充质干细胞通过PGE2/GSK一3β/Snail诱导肺癌EMT的作用及机制研究

Previous evidences demonstrate that human mesenchymal stem cell(MSCs) as an important member of tumor microenvironment favor tumor metastasis .Epithelial-mesenchymal transitions(EMT) are determinants of early metastasis.We have found MSCs were recruited to the sites of tumor and induced EMT in lung cancer through paracrine,which may be the important mechanism in lung cancer metastasis promopted by tumor microenviroment.We speculate that the event might be mediated by PGE2/GSK-3β/Snail influencing E-cadherin.We plan to fing study the mechanism in lung cancer cells through incresing or blocking their effect.The results will provide theoretical basis for new strategies in lung cancer metastasis.

骨髓间充质干细胞（MSCs）作为肿瘤微环境的重要成员具有明显的促肿瘤转移的作用，但具体调控机制有待进一步阐明。本项目组前期研究发现MSCs向肺癌微环境特异性趋化并通过旁分泌诱导肺癌细胞转移的早期关键事件EMT发生，且两者相互作用时PGE2表达明显升高，拮抗PGE2作用后MSCs的促肺癌细胞EMT作用受逆转，结合文献和既往的工作基础，我们推测：MSCs可能通过PGE2/GSK一3β/Snail导致E-cadherin表达下调从而促进肺癌EMT发生。为了验证这一假说，本研究拟通过肺癌细胞系、肺癌细胞与MSCs共培养体系，采用RNA干扰、细胞转染、western blot、裸鼠移植瘤模型等手段，从正反两个角度，由分子、细胞到动物水平探讨PGE2/GSK一3β/Snail在MSCs促肺癌EMT中的作用及机制，为深入研究肺癌微环境影响其转移的机制和寻找防治肺癌转移新的策略提供理论依据。

骨髓间充质干细胞（MSCs）作为肿瘤微环境的重要成员具有明显的促肿瘤转移的作用，但具体调控机制有待进一步阐明。本研究在确认成人骨髓MSCs通过微环境内细胞因子促进肺癌迁移、侵袭和EMT 的基础上，发现PGE2是其中促进肺癌EMT的重要细胞因子；进一步研究发现MSCs通过PGE2增加了肺癌细胞的ROS水平，进而增强其自噬反应； 自噬抑制剂3-MA可以抑制PGE2诱导的EMT, 自噬诱导剂雷帕霉素可以逆转PGE2受体抑制剂的作用；而通过细胞迁移实验、侵袭实验和EMT相关蛋白Vimentin、E-cadherin、Snail的Western blot检测最终证实MSCs可通过自噬途径促进肺癌细胞EMT。此外，体内实验也证实MSC通过PGE2对A549肺癌细胞移植瘤的作用主要在肿瘤转移上，MSCs促进了肿瘤细胞的自噬反应，抑制PGE2水平，使肿瘤细胞自噬反应降低。综合体内外研究结果提示，MSCs与A549细胞相互作用产生的微环境内，以PGE2为主的细胞因子通过促进肺癌细胞ROS/自噬反应诱导EMT转录因子Snail,进而促进Vimentin升高、E-cadherin降低，从而诱导其EMT发生，最终促进肺癌细胞迁移、侵袭。本研究的结果不仅为理解成人骨髓MSCs促进肺癌EMT的分子机制提供新的视点，也为深入研究肺癌转移机制和寻找防治肺癌转移新的策略提供理论依据。