Lnc-AB3在BAG3介导的人乳腺癌细胞侵袭转移能力增强过程中作用的研究

We found that exogenous BAG3 can increase the expression of CXCR4, resulting in enhanced ability of invasion and metastasis, as while as the expression of a certain LncRNA named Lnc-AB3 in MCF-7 human breast cancer cells. Lnc-AB3 competitively binds microRNA-9, whereas miR-9 strongly reduces the expression of CXCR4. Thus, we propose the pathway graphical lasso, that BAG3 activates Lnc-AB3 → Lnc-AB3 competitively binds miR-9→the decreased ability of miR-9 to silence CXCR4 →increased expression of CXCR4 →the increased abilities of tumor invasion and metastasis. In this study, we explore the interaction mechanism between Lnc-AB3 and miR-9 to elucidate the effects of Lnc-AB3 on CXCR4 expression, through studies on the enhanced metastatic and invasive abilities of MCF-7 induced by BAG3 via increasing CXCR4 expression, for better understanding the biological function of Lnc-AB3, and providing a potential target for breast cancer therapy.

我们发现外源性BAG3蛋白可通过上调乳腺癌MCF-7细胞CXCR4表达，增强其侵袭转移能力，同时激活细胞内被我们命名为Lnc-AB3的LncRNA的表达。Lnc-AB3可以与微小RNA9 (microRNA-9;miR-9)竞争性结合，而miR-9可以沉默CXCR4表达。于是，我们提出了BAG3激活Lnc-AB3→Lnc-AB3竞争性结合miR-9→miR-9沉默CXCR4能力下降→CXCR4表达增高→肿瘤细胞侵袭转移能力增强的假设。本项目拟通过对BAG3通过上调CXCR4的表达增强乳腺癌细胞侵袭转移能力的研究，探讨Lnc-AB3与miR-9相互作用机制，解析Lnc-AB3对CXCR4表达的影响，对更好地理解Lnc-AB3的生物学功能以及为乳腺癌治疗提供潜在的靶点。

外源性BAG3蛋白可通过上调乳腺癌MCF-7细胞CXCR4表达，增强其侵袭转移能力，同时激活细胞内Lnc-AB3的表达。Lnc-AB3可以与miR-9竞争性结合，而miR-9可以沉默CXCR4表达。肿瘤细胞的衰老是双刃剑。 我们使用依托泊苷构建肿瘤细胞的衰老模型，通过衰老相关的β-半乳糖苷酶，细胞周期和衰老相关的分泌表型来检测细胞的衰老程度。使用qPC和wb评估了衰老或非衰老细胞中lncRNA MEG3，miR-16-5p和VGLL4的表达。使用双重萤光素酶报告基因检测来检测miR-16-5p与lncRNA MEG3和VGLL4的结合。使用qPC和wb检测衰老相关标志物（p53，p21和p16）的mRNA和蛋白表达水平。 与对照组相比，衰老细胞中lncRNA MEG3和VGLL4的表达明显上调。敲低lncRNA MEG3和VGLL4减少衰老的程度以及p21和p16的表达。lncRNA MEG3干扰了衰老的A549和MCF-7细胞中miR-16-5p的表达。在衰老的A549和MCF-7细胞中，miR-16-5p调节了VGLL4的表达。lncRNA MEG3通过miR-16-5p / VGLL4轴参与了依托泊苷诱导的肿瘤细胞衰老进程。 本研究证实了lncRNA MEG3 / miR-16-5p / VGLL4轴在低剂量依托泊苷诱导的肿瘤细胞衰老模型中的调控作用，在治疗恶性肿瘤方面具有潜在的临床应用价值。