基于体内过程的“痛风汤散”抗痛风作用物质基础和机制研究

In view of the high incidence and low cure rate of gout and the lack of effective and safe drugs in the first-line clinical practice, the research team found that the traditional Tibetan medicine "TongFengTangsan" has significant anti-gout effect in the former study, but its anti-gout effective components and mechanism are still unclear. Therefore, based on the key pathological links - "uric acid elevation and inflammation" of gout, this subject integrates modern pharmacology, serum pharmacochemistry, bioinformatics and metabonomics, and studies the effects of "TongFengTangSan" in vivo on the regulation of uric acid-producing enzymes, uric acid transporters and inflammatory factors from the whole, tissue and molecular levels. Then the endogenous biomarkers and exogenous metabolites of "Tongfeng Tangsan" were obtained using UPLC-MS/MS technology and Peakview, MarkerView, MetaboAnalyst and other analytical methods. Then, the correlation between "endogenous biomarkers and biological effects of gout", "exogenous metabolites and anti-gout efficacy" was been constructed for the analysis of the main biomarkers, metabolic pathway, the anti-gout components and mechanism of Tongfeng Tangsan. It will provide the basis for its clinical application.

针对痛风疾病发病率高、治愈率低的特点和一线临床尚缺少高效安全药物的现状，课题组在前期研究中发现传统藏药“痛风汤散”具有显著的抗痛风作用，但其抗痛风效应成分和作用机制迄今尚不清楚。因此，本课题基于传统藏药的挖掘开发目的，以痛风“尿酸升高和炎症”关键病理环节为切入点，整合现代药理学、血清药物化学、生物信息学和代谢组学等技术，并基于体内过程从整体、组织、分子层面研究“痛风汤散”对尿酸生成酶、尿酸转运体、炎症因子的调控作用；继而利用UPLC-MS/MS技术和Peakview、MarkerView以及MetaboAnalyst等分析方法获得内源性生物标志物和“痛风汤散”的外源性代谢产物，并对“内源生物标志物与痛风生物效应”、“外源代谢产物与抗痛风药效”进行关联性分析，明确痛风的主要生物标志物和代谢通路以及“痛风汤散”抗痛风的效应成分与作用机制，为其临床应用提供基础依据。

痛风疾病发病率高、治愈率低，一线临床尚缺少安全高效药物。课题组在前期研究中发现传统藏药“痛风汤散”具有显著的抗痛风作用，但其抗痛风效应成分和作用机制迄今尚不清楚。因此，本项目主要从以下 3个方面对此进行研究，首先从分子和蛋白层面确证了痛风汤散的抗痛风作用；其次，考察了痛风汤散不同极性部位的抗痛风作用差异，并利用谱效关系筛选其中潜在的药效成分；最后基于代谢组学分析痛风汤散以及不同极性部位洗脱物干预后的代谢组学差异，并进行生物标志物和抗痛风生物效应的关联性分析，确证痛风汤散的潜在干预机制和主要活性部位。本项目通过整体动物实验，确证了痛风汤散的抗痛风作用，其可通过抑制XOD活性，调节尿酸转运体OAT1、URAT1和GLUT9的蛋白表达，和抑制炎症因子（IL-6, TNF-α和IL-1β）进而降调尿酸重吸收、促进尿酸排泄和减轻炎症反应，最终发挥抗痛风作用。痛风汤散不同极性部位洗脱物的抗痛风效应和成分的谱效相关性分析结果揭示了痛风汤散中的5个关键的潜在药效成分。血浆、肝和肾的代谢组学结果表明痛风汤散分别逆转了6个、13个和6个内源性代谢小分子，其中核黄素、尿酸、吲哚葡萄糖醛酸、尿苷和瓜氨酸可能是痛风汤散调节的潜在生物标志物。痛风汤散的抗痛风作用涉及嘌呤代谢，核黄素代谢，β-丙氨酸代谢，抗坏血酸和醛糖酸代谢，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢通路，其中嘌呤代谢可能是其调节的核心通路。痛风汤散60%乙醇洗脱部位抗痛风作用和调节机制与痛风汤散接近，可能是痛风汤散的主要活性部位。总的来说，本项目确证了痛风汤散的抗痛风作用和潜在作用机制，并明确了其活性部位，本项目研究成果可为痛风汤散的临床应用和药物开发提供参考依据。