C/EBPβ通过Atg4及/或DAPK1诱导异常自噬在高甘油三酯血症性急性胰腺炎发病中的机制研究

The incidence of hypertriglyceridemic acute pancreatitis is increasing but the specific pathogenesis remains poorly understood. Inappropriate activation of trypsinogen to trypsin within pancreatic acinar cells is a key factor leading to the development of pancreatitis. Impaired autophagy is involved in trypsinogen activation. In our previous study, we found expression of nuclear transcription factors C/EBPβ was upregulated and impaired autophagy in HTGP. It was reported that autophagy is regulated by C/EBPβ in several studies. Using animal model and in vitro cell model, We aim to confirm that C/EBPβ regulates impaired autophagy in HTGP and have influence on pancreatitis development and study the mechanisms through the follow signal pathway:(ⅰ)C/EBPβ activating autophagy related gene Atg4b pathway;(ⅱ)C/EBPβ integrating with ATF6 then to activate DAPK1 pathway. We hope the results of our study about targeting C/EBPβ/autophagy pathway will provide a theoretical basis in therapy of HTGP.

高甘油三酯血症性急性胰腺炎（hypertriglyceridemic pancreatitis, HTGP）发病率逐年升高，病情危重，但其发病机制仍不清晰。胰腺腺泡细胞内的胰蛋白酶原加速激活是介导HTGP胰腺损伤的首要步骤之一，自噬异常参与酶原激活的关键过程。我们前期研究发现：HTGP中核转录因子C/EBPβ表达增多，及存在异常自噬流。有研究报道C/EBPβ可以调控自噬，因此，本项目拟通过制备HTGP动物模型和分离培养胰腺腺泡细胞，阐明C/EBPβ通过调控以下途径：即自噬相关基因Atg4b和/或C/EBPβ与激活转录因子6（ATF6）结合后再激活死亡相关蛋白激酶1（DAPK1），诱发胰腺异常自噬，引起胰腺腺泡细胞内酶原加速激活，从而参与胰腺炎病情进展，以期能为针对性治疗HTGP提供科学的理论依据。

高甘油三酯血症(HTG)可加重急性胰腺炎(AP)，但其发病机制尚不清楚。由于自噬活性与脂质代谢和AP密切相关，我们研究了HTG加重AP模型的自噬反应，探讨自噬是否对HTG相关性胰腺炎有保护作用。在大鼠体内和体外建立了HTG相关的AP模型。比较炎症程度、胰腺损伤程度、内质网应激及自噬标志物(P62、LC3)的表达。用免疫荧光、电镜和免疫印迹法评价自噬通量。与正常饮食组相比，高脂饮食组(HFD)AP组出现更严重的胰腺损伤、细胞凋亡和自噬通量阻滞。此外,内质网应激的三个分支(PERK-eIF2α、ATF-6-GRP78、IRE1-sXBP1)和mTORC1/S6K1通路被激活。此外，在棕榈酸(PA)刺激的胰腺腺泡细胞(PACs)的体外实验中也证实了同样的现象。mTOR抑制剂雷帕霉素预孵育可恢复自噬通量，显著降低HTG的不良反应。核转录因子C/EBPβ表达在高脂血症胰腺炎中增多，通过抑制C/EBPβ可以防治诱发胰腺异常自噬，从而减轻胰腺炎症。综上所述，在高脂饮食背景下诱导的AP模型中，自噬通量受损，且与内质网应激密切相关。这为我们以自噬通路为靶点应用于高脂血症胰腺炎诊治提供了新的思路。