从海马区NR2B角度探讨孕早期母体接受氯胺酮、丙泊酚麻醉对SD大鼠子代学习记忆的影响机制

基础研究发现有些全身麻醉药可引起大脑神经细胞凋亡，对学习记忆功能有永久性损害。临床研究也证实部分病人全身麻醉后可出现长期的认知功能障碍。孕早期是胎儿大脑发育最易受影响时期，孕早期母体接受全身麻醉对其子代学习记忆功能的影响尚不清楚。本课题组前期研究发现：孕妇孕期接受全身麻醉，其胎儿出生后学习记忆功能显著降低；孕早期母体接收氯胺酮麻醉对大鼠子代学习记忆功能有不良影响，而咪唑安定或丙泊酚则不明显，但其机制尚不明确。海马区NR2B基因是公认的学习记忆正调控基因，NR2B受体是全身麻醉药的中枢作用靶点之一。本项目拟进一步研究孕早期母体接受氯胺酮或丙泊酚全身麻醉对SD大鼠子代海马区NR2B基因表达与蛋白水平的影响，旨在阐明孕早期母体接受氯胺酮或丙泊酚全身麻醉对其子代学习记忆的影响机制，为临床麻醉的选择提供更充分的科学依据。是省科技支撑计划重点项目（2009BSA09700）的后续研究。

目的 研究孕早期母体接受氯胺酮或丙泊酚麻醉对SD大鼠子代海马区NR2B基因表达与蛋白水平的影响，旨在阐明其对子代学习记忆的影响机制。方法 选择孕5-7天的SD母鼠335只，分为实验组和对照组（C组），实验组孕鼠分别接受氯胺酮、丙泊酚、咪唑安定、安氟醚、七氟醚或异氟醚麻醉麻醉2h、4h或8h。用Morris水迷宫测定子鼠学习记忆功能，分析子鼠海马组织超微结构、NR2B mRNA、NR2B蛋白、hippyragranin（HGN） mRNA、HGN蛋白及c-fos mRNA、c-jun mRNA表达水平变化。结果 氯胺酮、丙泊酚、安氟醚麻醉组子鼠逃避潜伏期较对照组子鼠延长，且随麻醉时间的增加延长俞明显（P＜0.05）；其穿越平台次数和第二象限活动时间则较C组子减少，且随麻醉时间的增加减少更明显（P＜0.05）。氯胺酮、丙泊酚麻醉组子鼠海马区细胞数量均较C组减少（P＜0.05），细胞核、异染色质、线粒体嵴、内质网可见异常改变，其中麻醉8h组可见细胞核消失及凋亡小体。与C组比较，氯胺酮、丙泊酚、安氟醚麻醉组子鼠海马组织NR2B mRNA和NR2B蛋白表达水平下降、HGNmRNA和HGN蛋白表达水平升高、NR2B/HGN比值明显降低（P＜0.05）。c-fos mRNA和c-jun mRNA表达水平与C组比较无明显差异(P＞0.05)。咪唑安定、七氟醚、异氟醚麻醉组子鼠前述指标与对照组子鼠无明显差异。结论 在本项目的麻醉剂量及麻醉时间条件下：孕早期母体接受氯胺酮、丙泊酚或安氟醚麻醉对子代学习记忆功能有明显损害，且呈一定的时-效关系。机制与其下调SD大鼠子代海马区学习记忆正调控因子NR2B的表达，上调海马区学习记忆负调控因子HNG的表达，进而破坏子代海马区学习记忆正/负调控平衡有关，与c-fos mRNA和c-jun mRNA表达无明显关系。孕早期母体接受咪唑安定、异氟醚或七氟醚对子代学习记忆影响不明显。