宁夏枸杞叶防治阿尔茨海默病的机制研究

随着研究逐步深入，α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）在老年性痴呆疾病（AD）中的作用已引起越来越多关注，脑内神经细胞特别是胶质细胞α7nAChR被激动剂激动后，表现出很强的神经保护作用。我们前期实验筛选了部分有效中药，其中宁夏枸杞叶能够明显改善实验动物学习记忆、提高α7nAChR表达及减弱β淀粉样蛋白毒性。由此我们推测枸杞叶防治AD的可能机制为：①直接调节神经元细胞上的α7AchR来实现对神经元的保护作用；②激活星形胶质细胞α7AChR直接减弱星形胶质细胞分泌炎性介质；③激活星形胶质细胞α7AChR通过减少星形胶质细胞分泌趋化因子，减弱对其它炎性细胞迁移和浸润的诱导，使颅内自身毒性环路形成减缓，从而减轻对神经元毒性损伤。本项目旨在利用体、内外实验和含药脑脊液、含药星形胶质细胞条件培养液、液相芯片技术及免疫双标等实验技术来验证以上推测，为枸杞叶能够成为将来防治AD候选药物提供实验依据。

本项目利用当前研究AD发病机制的常用细胞和动物模型，从体外和体内两方面初步证实枸杞叶和枸杞多糖对体外培养的SD大鼠海马神经元和星形胶质细胞及SAMP8和自然衰老昆明小鼠均有神经保护作用。其中体外实验证明，枸杞叶和枸杞多糖含药脑脊液均能上调体外培养的SD大鼠海马神经元和星形胶质细胞α7nAChR的表达，提高海马神经元和星形胶质细胞的活性，减少凋亡的发生，影响星形胶质细胞炎性分泌因子IL-lα, IL-1β, IL-6,TNF-α和MIP-1的表达；体内实验证明，枸杞叶及枸杞多糖均能改善SAMP8和自然衰老昆明小鼠的学习记忆能力和老化程度，上调SAMP8和自然衰老昆明小鼠脑神经元和星形胶质细胞α7nAChR的表达，改善SAMP8和自然衰老昆明小鼠脑、肝脏、肾脏的SOD及MDA活性,改善脑、肝脏和肾脏的超微组织形态结构，另外枸杞叶和枸杞多糖均可抑制SAMP8和自然衰老昆明小鼠骨质疏松的发生。由此说明枸杞叶及枸杞多糖防治AD的作用机制可能是通过调节多种途径、改善多种器官衰老进程的共同作用的结果，但就本项目计划要研究的对于枸杞叶防治AD的作用机制是否通过 α7 nAChR 来介导神经保护，由于α7 nAChR在激动剂和拮抗剂作用下，其表达都表现为上调这一受体特性结果的出现，使得本研究还需今后进行α7 nAChR功能性相关实验做进一步的证实。. . 本研究计划完成：. ① 体外实验:检测枸杞叶对海马神经元和胶质细胞α7nAChR的激活及胶质细胞被激活后分泌因子对海马神经元细胞的作用。. ② 体内实验:检测枸杞叶对不同月龄（3、5、7月龄）快速老化模型SAMP8小鼠脑内Aβ和神经元细胞及胶质细胞α7nAChR的影响。. . 执行情况：. 本研究的实验内容全部按计划完成，另外为使本研究结果更为完整和系统，也为使枸杞叶的临床应用提供更坚实的技术支撑，本实验在此补充了以下研究内容：. ① 增加了枸杞多糖对海马神经元细胞及胶质细胞的影响研究；. ② 增加了枸杞叶对不同月龄（3、5、7月龄）快速老化模型SAMP8小鼠、脑、肝脏、肾脏、睾丸等器官的抗氧化指标及形态结构的影响研究； .. 本项目经费使用基本合理，发表论文5篇，培养研究生2名，生物技术专业本科生6名，参加国际学术会议1人1次，国内会议2人3次。