雌激素介导Wnt/β-catenin 促进子宫内膜异位症形成机制研究

以β-catenin基因cDNA 为探针，鉴定该基因启动子区域是否包含雌激素反应元件；共转染与双荧光素酶方法分析ERα对β-catenin基因靶启动子转录活性的影响，利用ChIP技术鉴定ERα在该基因靶启动子区域可能作用位点，阐明雌激素调控β-catenin基因表达的分子机制；CoIP验证ERα 与β-catenin及Lef-1、Tcf-3之间的相互作用，利用共转染与双荧光素酶方法及ChIP技术研究雌激素介导β-catenin/TC介导调控E-cadherin、VEGF和MMP9基因转录激活的分子机制；最后建立内异症裸鼠模型进行整体水平验证，以阐明雌激素介导Wnt/β-catenin信号通路调控异位子宫内膜粘附、侵袭和血管生成的机制，为内异症基因治疗提供新的靶点.

子宫内膜异位症是雌激素依赖性疾病,是指子宫内膜生长到子宫腔以外的地方,其发病机制包括黏附、侵袭和血管生成。雌二醇是人体中最具有活性的雌激素，在子宫内膜异位症的发生发展中扮演重要角色。活化的b-catenin信号通路参与了多个核的信号转导，以协调组织或细胞的特定功能。在结肠癌和乳腺癌中，已发现雌激素受体A和b-catenin的同一免疫复合物沉淀。B-catenin信号通路在雌激素相关的正常子宫生理过程中起着重要作用，通过雌激素受体A和b-catenin蛋白与蛋白之间的相互作用。然而，雌激素与b-catenin信号通路的交叉通话在子宫内膜异位症中发病机制的作用是未知的。在本研究中，我们证明了在人子宫内膜间质细胞中，雌二醇激活b-catenin信号通路并能促进b-catenin入核。我们进一步在核内发现雌激素受体A、b-catenin 和 LEF-1/TCF-3三者的复合物。所有的结果证明，雌二醇刺激导致b-catenin核内的累积，从而与TCF/LEF家族相互结合，转录激活下游靶基因，如MMP和VEGF等基因。这些结果再一次证明了异常雌激素水平下，B-catenin信号通路在子宫内膜异位症中的重要性。总的来说，本研究证明了雌二醇增加B-catenin的表达，并且与TCF/LEF家族相互作用，增加了异位内膜的侵袭和血管生成。鉴于B-catenin信号传导途径参与了子宫内膜异位症发生发展的多重作用，雌二醇可以通过上调B-catenin表达加速疾病进展。因此，这些发现可提供用于子宫内膜异位症的治疗中具有潜在的治疗靶点。