PCG相关蛋白RYBP在肝细胞癌发病和预后中的分子流行病学研究

Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common malignant tumors in southern Guangxi. High invasion, metastasis and recurrence contribute much to the poor prognosis of HCC. RYBP is a newly identified member of polycomb group (PcG) family participating in composition of PcG repressor complex and inhibiting transcription as well as involved in cell proliferation and apoptosis，which may play a role in invasion and metastasis. Funded by Natural Science Foundation of China, we have discovered by previous works that RYBP expression decreases significantly in 86％ cancer tissue samples compared to adjacent noncancerous tissue samples, FOXO4 expression level is related to tumor metastasis, and HCC patients with FOXO4 expression rising gradually have obviously prolonged lifespan by preliminarily detecting 50 pairs cryopreserved carcinoma and adjacent noncancerous tissues of HCC patients after curative resection. This project prepares to make prospective follow-up of survival HCC patients after curative resection. Large-scale clinical HCC samples combining with vitro&vivo experiment are conducted to validate the role of RYBP expression loss or down-regulation playing in HCC pathogenesis and prognosis, investigate the influences on HCC cells biological characteristics with RYBP expression changing, and primarily study the molecular regulation mechanisms of RYBP that participates in EMT in HCC invasion and metastasis , so as to provide reference for screening of HCC susceptible population and judging clinical prognosis and provide evidence for searching potential targets of HCC diagnosis and treatment.

肝癌是广西南部高发的恶性肿瘤，其高侵袭性、高转移复发性，往往是制约其整体疗效的关键。RYBP是新近识别的多梳蛋白(PcG)家族成员，除参与PcG抑制复合物组成和抑制转录功能外，与细胞增殖和凋亡密切相关，可能具有抑制肿瘤侵袭转移的作用。在国家自然科学基金的基础上，我们初步检测了50对肝癌手术患者的冻存癌和癌旁组织，发现86%的样本癌组织中RYBP表达明显低于癌旁组织，其表达水平与肝癌转移有关，且患者的生存时间随表达水平的升高而呈明显延长趋势。利用前期工作积累，本项目拟对肝癌手术存活患者进行前瞻性随访，采用大规模临床肝癌样本的关联研究结合体内外实验方法，进一步验证RYBP基因表达缺失或下调在肝癌发病和预后中的作用，探讨RYBP表达变化对肝癌细胞生物学特性的影响,初步研究RYBP参与EMT影响肝癌侵袭转移的分子调控机制，为筛选肝癌易感人群及临床判断预后提供参考，为寻找肝癌潜在的诊治靶标提供依据。

肝癌是消化系统常见的恶性肿瘤，起病隐匿，恶性程度高，其高侵袭性、高转移复发及生存期短一直是困扰临床的难点和热点。本项目通过四年的研发，筛选出一些与肝癌发生发展相关的生物标志物，为肝癌潜在的诊治靶标和临床判断预后提供了新线索，其主要成果如下：.1) 本研究检测了216例肝细胞癌及癌旁组织中RYBP的表达情况，结果分析发现RYBP 在肝癌中表达明显低于癌旁组织，其表达与肿瘤直径、有无转移及预后不良有关，且与ZEB1、ZEB2等因子的表达呈负相关关系，提示RYBP低表达可能促进肝癌的侵袭和转移，在肝癌的EMT过程中可能发挥着重要的作用，有可能成为肝癌预后新的生物标志。此外，RYBP低表达在胰腺癌中也得到验证，认为RYBP低表达可能与胰腺癌发生发展密切相关。.2) 本研究选取新发肝癌病例和对照各1100余例，利用高通量荧光PCR进行基因分型，同时对部分术后患者进行随访，结果发现RYBP、MLH1等基因多态性可能是广西人群肝细胞癌的危险因素之一，且与肿瘤家族史、饮酒、HBsAg阳性之间存在交互作用。结合临床资料分析发现患者的某些临床特征如肿瘤数目、有无远处转移和基因多态性与肝癌的预后有关，提示RYBP、MLH1等基因位点是肝癌不良预后的危险因素。.3)此外，利用现代分子生物学技术，分析了MYC、CMTM家族等基因在肝癌发生发展中作用及分子调控机制，发现这些基因不仅与患者的临床病理特征有关，生存分析还发现可能与肝癌不良预后有关，认为在肝癌发病风险和预后中起着重要的作用。.4) 通过研究开发，建立了肝癌生物标本库队列（其中病例和对照血样各1200例以上；肝癌及癌旁组织各200例以上）；建立了一个稳定的检测技术平台，建立了有效的预警预测系统，初步形成了系统流行病学研发团队。成果在部分高校及医院对大学生、患者和医务人员等进行宣教，提高了人群的防病意识，具有很好的推广应用价值。.5) 目前发表相关论文13篇，培养硕士生4名；参加各种学术交流会议10余人次。获得了2018年国家自然基金项目1项，2017年获得了广西重点研发计划项目1项，获实用型专利1项。