单细胞中活性氧组分形态分析的研究

单细胞中活性氧组分的形态分析对研究细胞信号传导、生理病理和重大疾病的早期诊断等有重要意义。由于荧光图像技术中激光共聚焦显微镜等仪器不具备分离能力,而顺磁法中的自旋捕集技术又不具备足够的灵敏度，至今尚未见同时测定单细胞中超氧阴离子、羟基自由基、单线态氧和过氧化氢等不同活性氧组分形态分析的报道。本课题首次提出用高选择性的荧光探针通过细胞内衍生法，分别标记细胞内不同的活性氧组分后，用微流控芯片进样技术操控细胞, 使单细胞在芯片毛细管电泳分离通道的指点位置定位、溶膜，通过芯片CE高效分离结合LIF同时定量测定单细胞中超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢和单线态氧含量的形态分析新方法。通过本课题研究，不仅可以测定癌细胞和正常细胞内活性氧各组分的含量和差异，以及在外界刺激后细胞内活性氧各组分含量的变化规律，而且为研究与活性氧有关的信号传导规律和癌症的早期诊断提供了高灵敏度、高选择性和高分辨率的分析方法。