抗P-选择素靶向补体抑制物治疗脑缺血再灌注急性炎症损伤的实验研究

脑缺血性再灌注引起的继发性炎性损伤与补体激活和P选择素的高表达密切相关。为了进一步提高疗效，利用分子生物学技术，构建并表达了靶向P选择素的单链抗体ScFv-Crry和ScFv-CD59靶向补体抑制物，通过体外实验（补体裂解抑制、流式细胞分析、生物传感器亲和力分析等）和体内实验（生物学分布和免疫组化）鉴定其生物学活性，利用脑缺血再灌注小鼠动物模型，在脑缺血1h再灌注30min后，分别尾静脉注射ScFv-Crry、ScFv-CD59蛋白，24h后通过神经功能缺损评分、免疫学、分子生物学和病理学检测，观察其对脑缺血性再灌注后炎性损伤的治疗作用。最终获得具有治疗脑缺血性再灌注继发性炎性损伤的抗P选择素单链抗体靶向补体抑制物蛋白，该蛋白在靶向炎症部位的同时对炎症相关的两条激活途径进行抑制，这既提高了抗炎作用，达到治疗目的，又降低了用药剂量和副作用，为研究新的脑缺血再灌注炎症损伤靶向治疗药物奠定基础。

脑血管疾病是严重危害人类健康的一种非常重要的疾病。脑缺血再灌注后脑组织急性炎症反应，进一步加重了缺血性脑血管病损伤的程度。现已有很多证据证明脑缺血性再灌注引起的继发性炎性损伤与补体激活和P选择素的高表达密切相关。但在治疗方面，目前还没有特效的药物及方法。因此，本研究构建并表达了靶向P选择素的单链抗体ScFv-Crry和ScFv-CD59靶向补体抑制物，利用脑缺血再灌注小鼠动物模型，观察其对脑缺血性再灌注后炎性损伤的治疗作用。结果表明靶向补体抑制物对小鼠脑缺血再灌注损伤具有很好的治疗效果，可在炎症损害部位高度聚集，可以减小脑梗塞体积、保护神经细胞、降低神经功能的损伤、抑制补体的激活，同时降低纤维蛋白原的沉积并减少中性粒细胞渗出等。该研究最终获得具有抗炎作用的靶向补体抑制物蛋白，为研究新的脑缺血再灌注炎症损伤靶向治疗药物奠定基础。