新疆传统药用植物八株拮抗内生菌代谢物有效成分的研究

骆驼刺、准噶尔乌头、块根芍药和刺山柑是新疆传统的药用植物，其主要活性成分为黄酮类和生物碱类化合物，乌头碱，芍药甙，多糖和糖苷类等。从这4种植物中所分离筛选到的，对多种植物致病菌具有较广谱的抗菌活性，并对玉米大斑病菌、玉米小斑病菌和苹果斑点落叶病菌均有较强拮抗作用的内生细菌XJAS-AB-7、10、11，XJAS-ZB-14、36，XJU-PA-6以及对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均有较明显抑制活性的内生真菌XJCS-MF-6和XJCS-MF-10发酵液中的拮抗活性成分分别进行分离和检测分析，从中分选出与宿主植物主要有效成分相同或类似的化合物以及灵菌红素类等其它代谢物活性成分，并对其各单体化合物进行结构鉴定，通过动、植物活体实验验证其对上述致病菌的拮抗作用效率和药物作用性质。从而为新疆特色植物资源的保护利用，其内生菌资源在新特药物和生物防止剂的开发利用奠定基础。

1.对分离自新疆传统药用植物拮抗内生细菌代谢物有效成分进行的跟踪分析研究结果显示，骆驼刺拮抗内生菌XJAS-AB-11产生的有效成分分别为环[D-亮氨酰-4-羟基-L-脯氨酸]二肽（XJAS-B）和4H-1-苯并吡喃4,2 – (3,4 - 二羟基苯基)-3,5,7 -三羟基黄酮(槲皮素，即XJAS-G)；刺山柑拮抗内生菌株XJCS-MF-6代谢物中主要活性成分为邻苯二甲酸二丁酯、7-羟基-2-羰基吲哚-3基乙酸和对羟基苯甲酸乙酯；准噶尔乌头拮抗内生菌XJAS-ZB-36代谢物活性成分鉴定为环(L-丙氨酸-4-羟基-L-脯氨酸)和环(L-苯丙氨酸-4-羟基-D-脯氨酸)；灵菌红素类是均有一定的免疫活性物，具有抑制真菌、细菌和霉菌等功效，将块根芍药拮抗内生菌XJU-PA-6所产红色素最终鉴定为2-甲基-3-戊基灵菌红素。2. 活体实验结果证明，骆驼刺拮抗内生细菌XJAS-AB-11、XJAS-AB-13 和准噶尔乌头拮抗内生细菌XJAS-ZB-14发酵液对玉米大、小斑点病菌具有良好的生物防治作用，其防病效率分别为83.34%-42.48%和85.57%-41.69%，分别达0.1%多菌灵防病率的83.34%-57.36%和64.28%-54.91%；防御酶活性测定结果表明，以上拮抗内生菌发酵液能减轻玉米斑点病菌侵染玉米叶片时的毒素含量，有效地防治病情发生。3. 美国国立癌症研究所(NSI) 证实，灵菌红素对人体57种不同癌细胞有抗性作用。 目前，对于灵菌红素的应用主要集中在药理、临床及如何获得高产菌株等方面。本项目首次研究证明，2M3P灵菌红素对宫颈癌siHa和结肠癌SW480细胞具有良好的抑制作用；通过建立宫颈癌Siha细胞裸鼠移植瘤模型，在活体水平进一步验证了2M3P 灵菌红素对宫颈癌Siha细胞增值抑制作用，并初步搞清了其诱导宫颈癌Siha细胞凋亡作用相关基因；免疫组化学实验表明，caspase-9、Bax等两个蛋白在各组肿瘤组织上都有一定的表达，caspase-9在高剂量组中的表达率90%以上，Bax蛋白的表达率达到80%。此成果为新型抗肿瘤药物开发提供了科学依据。.本项目研究成果对于新疆药用植物内生菌资源及其代谢物中天然药物资源的开发利用以及资源保护应用有一定的理论价值和现实意义。