海南南药拮抗内生菌的筛选及抗菌活性物质研究

海南省是中国最大的"热带宝地"，有着丰富的药用植物资源，药用植物达3100多种，可谓名副其实的"天然南药宝库" 。药用植物内生菌多样性十分丰富，由于特殊的生存环境，药用植物内生菌在生长和代谢过程中可以产生各种具有特殊化学结构类型和特殊生理功能的活性物质，这是研究开发农药先导化合物珍贵的原料宝库。目前，有关海南南药内生菌的研究相对较少，本项目拟在前期工作的基础上，以热区危害严重的植物病原菌为受试菌，从海南南药植物中筛选具有较高抗菌活性的内生菌10株左右，并对其产生的天然抗菌活性产物进行结构解析及优化，获得抗菌活性化合物10个以上，新化合物1-3个，评价其作为农药先导物的价值，为海南南药内生菌的深度利用和开发奠定良好的基础，对于保护日益减少的珍稀南药资源也具有积极的意义；同时有利于促进生物防治手段的应用，减少化学农药使用量，有利于海南建设生态省政策的实施，具有良好的生态效益和社会效益。

海南省药用植物资源丰富，是名副其实的“天然南药宝库”。目前，有关海南南药内生菌的研究相对较少。本项目从海南省各地采集南药样品，样品涉及槟榔、砂仁、益智和阴香等20余种，从中共分离内生菌200余株，以热区危害严重的植物病原真菌为受试菌，从中筛选出16株具有较高拮抗活性的菌株，其中内生细菌8株，内生真菌8株，通过鉴定发现它们具有较好的生物多样性，抗菌谱较广。对LYM3、DYSJ3、JLR6等部分菌株的发酵条件进行了优化，获得了其最适培养基组成和培养条件，研究了活性成分的提取工艺，多数活性产物粗提物较容易制备，拮抗活性高，且具有较好的稳定性。盆栽试验或活体接种试验发现DYSJ5、WYG5和SR06等菌株对香蕉枯萎病、芒果炭疽病及香蕉炭疽病具有较好的防效，并初步获得了相应菌株的应用方法。利用活性跟踪的方法，从LYM3、DYSJ3、SR05等菌株中共分离得到抗菌活性化合物12个，其中从内生细菌LYM3的发酵液中分离出三种环状脂肽类化合物，分属于伊枯草菌素和表面活性素两类，对香蕉炭疽菌具有较强的抑制作用；从杂色曲霉DYSJ3的菌丝体中分离出4中抗菌活性产物，其中化合物DYSJ3-3和DYSJ3-4为首次从该菌种中分离，可能为新化合物，DYSJ3-4对香蕉炭疽菌和芒果炭疽菌具有较强的抑制作用，可有效的防控炭疽病在果实上的发生。本研究为海南南药内生菌的开发和利用奠定了一定的基础。