子宫内膜浆液性癌的早期诊断研究

子宫内膜浆液性癌（ESC）恶性程度高，预后差；而其发病机制尚不清楚，故癌前病变的确立对于早期诊断，改善预后具有重要意义。课题组前期工作中，提出子宫内膜腺体异型增生（EmGD）是ESC的癌前病变这一假说。DNA甲基化是恶性肿瘤发生中的早期事件。因此，我们推测EmGD中也存在DNA甲基化。本研究中我们首先利用DNA甲基化芯片筛选出数个子宫内膜浆液性癌特异性甲基化基因（ESSMGs）；进而在ESC的石蜡组织标本中（包含良性子宫内膜，EmGD，子宫内膜上皮内癌和/或ESC），应用激光显微切割与实时荧光甲基化特异性PCR，检测ESSMGs在上述不同组织中的状态，进一步从表观遗传学角度为EmGD是ESC的癌前病变提供证据支持；在此基础上建立一种基于甲基化的检测手段，通过对子宫内膜细胞的甲基化状态分析，实现对ESC的早期诊断；本研究ESSMGs的发现有望为子宫内膜浆液性癌的早期预防和治疗提供新靶标。

子宫内膜浆液性癌（ESC）恶性程度高，预后差。课题组在前期工作中，提出子宫内膜腺体异型增生（EmGD）是ESC的癌前病变这一假说，为从表观遗传学角度验证这一观点，课题组收集子宫内膜浆液性癌（ESC）、子宫内膜样腺癌（ECC）、正常子宫内膜（NE）各10例，利用Illumina 450K Infinium Methylation BeadChip进行检测，选取针对Illumina甲基化芯片平台而设计的lumi开源R包做数据处理，筛选出数个子宫内膜浆液性癌特异性甲基化基因（ESSMGs）。利用实时定量甲基化特异性PCR（q-MSP）在30例NE、44例ECC及33例ESC石蜡标本进行验证，最终筛选出4个ESSMGs，其中高甲基化组（RCN3、ECRG4、LGR5）（p<0.001），低甲基化组（IMP3）（p<0.01）。并进一步利用q-MSP检测目的基因（RCN3、ECRG4、LGR5、IMP3）在12例EmGD和对应ESC中的甲基化分布，发现EmGD与ESC中甲基化谱无显著性差异（p>0.05），从而首次从表观遗传学角度验证了EmGD是ESC的癌前病变这一假说；课题组同时首次通过体内、体外实验探索原癌基因IMP3对子宫内膜癌细胞系（Spec-2、Ishikawa）增殖、侵袭迁移及裸小鼠皮下成瘤等生物学行为的影响，证实了IMP3蛋白在促进子宫内膜癌细胞增殖、侵袭迁移等方面的重要作用，并探索IMP3作用的分子生物学机制，初步明确了IMP3通过p38信号通路发挥作用，为子宫内膜浆液性癌的早期诊断、预防及治疗新药的研发提供了新靶点。