基于“体阴而阴不足”从cAMP/PKA/CREB与TGF-β1/Smads/CTGF多信号通路探讨育阴软肝颗粒治疗肝纤维化的机制

Based on body Yin but deficiency and therapy of raising Yin and soften hepar, Yuyin Ruangan Granule (YRD) has exact treatment on hepatic fibrosis(HF). Hepatic Yin deficiency and hepatic fibrosis are related to cAMP/PKA/CREB signal pathway, and abnormal activation of TGF-β1/Smads/CTGF plays an important role. Based on above, we propose the hypothesis that deficiency of hepatic yin is the basic pathogenesis of HF and treating mechanism of YRD may be related to the signaling pathways of cAMP/PKA/CREB and TGF-β1/Smads/CTGF. We study YRD’s effectiveness on characterization of Yin deficiency and signaling pathways after replicating model of HF. In this project, we first put forward the basic pathogenesis of HF, which is deficiency of hepatic yin, and discuss the effects of YRD on cAMP/PKA/CREB and TGF-β1/Smads/CTGF in treating HF from organ, cell and molecule. This topic provides a new idea and method for treatment of the HF.

肝“体阴而用阳”、“阳常有余阴常不足”，故“体阴而阴不足”是肝病的基础矛盾，研究证实育阴软肝颗粒（YRD）对肝纤维化（HF）有确切疗效，但具体机制不清；肝阴不足和HF与cAMP/PKA/CREB信号通路偏亢有关，而TGF-β1/Smads/CTGF信号通路异常激活在HF过程中发挥关键作用。据此，我们提出“‘体阴而阴不足’是肝病的基础矛盾，肝阴不足是肝纤维化的基础病机，而血瘀癥积是肝纤维化的典型症状，育阴软肝颗粒通过调节cAMP/PKA/CREB信号通路而育阴软肝，通过调节TGF-β1/Smads/CTGF信号通路而化瘀消癥”的工作假说。在复制HF模型的基础上，研究YRD缓解阴虚表征、抗HF过程中对上述信号通路的调控。本课题首次提出肝阴不足是HF的基础病机，并探讨上述信号通路在YRD治疗HF过程中的作用及相互关系，为临床防治HF提供新思路与新方法。

目的：基于“体阴而阴不足”中医药理论从TGF-β1/Smads/CTGF与cAMP/PKA/CREB多信号通路的角度探讨育阴软肝颗粒（YRD）治疗肝纤维化的机制。方法：采用复合因素来复制肝纤维化大鼠模型，即皮下注射四氯化碳的同时灌胃乙醇，复制肝纤维化大鼠模型，同时采用梯度乙醇灌胃法复制大鼠酒精性肝纤维化动物模型，复制模型的同时给予药物干预，实验过程中观测受试药对肝纤维化大鼠阴虚证表征相关指标的影响，实验结束后观测YRD对肝纤维化大鼠肝组织纤维化病理变化、肝功能、肝脏指数、肝组织含水量以及血清肝纤维化相关指标的影响，同时测定肝组织中TGF-β1/Smads/CTGF、cAMP/PKA/CREB通路中关键蛋白及其基因的表达水平，研究YRD对肝纤维化的治疗作用及其作用机制。结果：YRD可明显缓解复合因素所致肝纤维化大鼠饮水量与进食量的增加，维持体重增长，增加舌面水分，减少大鼠的站立次数与活动次数，缓解肝组织病理学变化；YRD能降低血清ALT、AST、ALP以及HA、PCⅢ、C-Ⅳ、LN的水平，减少肝组织含水量、降低肝脏指数；同时，在YRD的干预下，肝组织中TGF-β1、Smad3、CTGF、cAMP、PKA、CREB及其基因的表达水平下调，而Smad7基因的表达持续升高。结论：YRD具有明显的降酶保肝、抗肝纤维化的作用，同时YRD可缓解阴虚证表征相关指标，而调节TGF-β1/Smads/CTGF、cAMP/PKA/CREB信号通路是其抗肝纤维化的作用机制之一。