Clnk 介导TNF诱导L929细胞死亡信号的分子机理

近几年我们致力于肿瘤坏死因子TNF诱导的细胞死亡信号通路相关基因的功能研究。用逆转录病毒随机插入失活的方法先后发现β-actin、H-ferritin和ANT3在介导TNF诱导的细胞死亡中起重要作用。最近我们发现逆转录病毒插入使Clnk基因失活的L929细胞表现出对TNF很强的抗性，但将携带全长Clnk蛋白编码区的质粒转入该细胞后，细胞又恢复了对TNF的敏感性，说明Clnk 与TNF诱导的细胞死亡密切相关。他人的研究显示，Clnk参与介导免疫细胞炎症反应信号，我们的发现证明Clnk 是一个多功能蛋白。在该项目中我们拟通过基因转染、siRNA、酵母双杂交、免疫共沉淀、FACS等技术系统地研究Clnk 介导TNF诱导的细胞死亡信号的分子机理，从而更全面地了解Clnk 的生物学功能。

按照研究计划，在本项目研究中，使用RNAi技术，进一步证实了Clnk参与TNF诱导的L929细胞的死亡信号通路。Clnk也选择性介导其它胁迫因素诱导的细胞死亡。有趣的是，Clnk抑制Rip1过表达导致的细胞死亡，但并不和Rip1直接相互作用。NF-kB和p38信号通不参与TNF诱导的Clnk介导的细胞死亡信号通路，可见，Clnk不是通过干扰细胞的成活信号而导致细胞死亡的。Clnk缺失干扰TNF诱导的线粒体成簇的分布和ROS的产生。Clnk介导的细胞死亡的功能可能与它的磷酸化相关。我们的研究揭示了Clnk介导的TNF诱导的细胞死亡的某些机制。因为Clnk是细胞内重要的接头蛋白之一，我们将进一步深入研究其介导TNF死亡信号的分子机理，全面认识该分子的功能。