信号肽C端和成熟蛋白N端氨基酸序列对蛋白质分泌影响

本研究以本室构建的B,Lichenifermisα-淀粉酶基因pAmg413为材料，通过定点诱变，或引入Polylinker创造新的信号肽酶识别窗口，获得三个构建株：PAmg413B，413L和413-21。前二株为野生株的3%和36%，第三株则加3-5倍；成熟蛋白未端分析表明：前二株信号肽酶识别序列是Ala-Ala-Ala^Ala，（无法证明创造的识别序列是否被切割），第三株切割位点前移了一个氨基酸；pAmg413B7Arg取代了原来的7Leu；413L在信号序列内引入一个Polylinker，增加转角结构，创造一个新的识别窗口；413-21株，3Asp取代了原来的3Asn；正电荷的引入阻碍分泌，负电荷引入增强分泌，符合共翻译转移模型。