大黄素与AQPs结合及其对大鼠高原脑水肿防治的实验研究

高原脑水肿的救治是世界性难题。本课题拟在以往我们发现大黄素阻断神经元兴奋性突触后传递、降低脑过度兴奋，减轻脑水肿、降低颅内压的基础上，探讨大黄素是否通过与水通道蛋白结合调节脑脊液循环,干预高原脑水肿。研究拟克隆、表达和纯化水通道蛋白AQP1和AQP4， 通过生物传感器测定大黄素和AQP1、AQP4的亲和力，分析大黄素与AQP1、AQP4是否结合；通过双荧光标记，用激光共聚焦观察大黄素分别与抗AQP1单克隆抗体、抗AQP4单克隆抗体在体外培养以及正常、高原脑水肿脑片的脉络丛血管内皮细胞、星型胶质细胞的空间分布，分析正常生理状态和高原脑水肿时，大黄素在空间分布上是否与AQP1或者AQP4一致；并且构建大鼠4500m高原脑水肿模型，设计对照观察大黄素对大鼠高原脑水肿的影响，以期进一步认识水通道蛋白在高原脑水肿发生、发展中调节脑水平衡的分子机制，同时为大黄素防治高原脑水肿的机理寻找其作用靶点。