肿瘤相关巨噬细胞来源的肾上腺髓质素在新生血管生成、肿瘤生长和转移中的作用与机制研究

肿瘤相关巨噬细胞（TAM）在肿瘤的发生和发展中起着非常重要的作用，但其机制尚不明确。近来，有研究显示肾上腺髓质素（AM）是一种新生血管生成的促进因子。在缺氧或者炎症的情况，巨噬细胞分泌AM的能力明显增强。这些结果提示TAM很可能通过AM参与新生血管的生成及肿瘤的生长和转移。本项目将利用人的肿瘤组织，细胞系和原代细胞探讨TAM和AM相互关系，阐明TAM促进肿瘤进展的机制。另外一方面从分子水平、细胞水平、动物水平研究TAM来源的AM在新生血管生成、肿瘤生长和转移中的作用，并从旁分泌和自分泌的角度研究其作用机理。在此基础上，研究AM及其受体在正常组织，原发瘤及其转移灶组织内的表达及AM在正常人、无和有转移癌症患者血清中的含量，进一步揭示AM及其受体作为癌症治疗靶点的可行性，为临床控制癌症提供理论依据。

在黑色素瘤中，肿瘤微环境中增加的肿瘤相关巨噬细胞（TAM）通常和肿瘤的预后差有着紧密的联系，但是目前TAM调节黑色素瘤的生长机制还不是很清楚。本研究主要是想探索TAM分泌产生的肾上腺髓质素（ADM）在肿瘤血管新生和黑色素瘤生长中所起的功能和所对应的机制。因此我们利用体内和体外模型来研究黑色素瘤中TAM和ADM的相互关系以及ADM在TAM诱导的肿瘤血管新生和肿瘤生长中所扮演的角色和作用机制，同时我们也利用黑色素瘤组织芯片进一步探究了ADM及其受体表达水平的临床学意义。. 我们发现在人的黑色素瘤中的TAM能够表达大量的ADM，当将巨噬细胞和黑色素瘤细胞共培养或者用黑色素瘤细胞的条件培养基（CM）后，巨噬细胞分泌的ADM的量会大量增加。此外，我们还发现巨噬细胞能够促进内皮细胞的迁移以及内皮细胞管腔结构的形成并且可以促进B16/F10肿瘤的生长。用ADM的抗体或者ADM受体拮抗剂AMA能够在体外抑制TAM所诱导的血管新生，同时在体内能够抑制肿瘤的生长。此外，我们发现ADM促进肿瘤血管新生以及肿瘤的生长是通过旁分泌的机制，该机制是由内皮一氧化氮合成酶信号通路所接到的，ADM还能够通过自分泌的方式来发挥作用，即可以作用于巨噬细胞自身进而使巨噬细胞转变为激活态的M2型，终上所述，巨噬细胞合成ADM并以旁分泌和自分泌的方式来促进肿瘤的血管新生和肿瘤的生长。最后，我们还通过免疫荧光的方法来比较了人黑色素瘤组织及癌旁正常皮肤中ADM及其受体的表达水平，结果显示在癌组织中，ADM和其受体的表达水平明显高于正常皮肤。. 我们的研究结果揭示了TAM通过分泌ADM促进黑色素瘤血管新生和生长的新机制，并且为黑色素瘤的治疗提供了潜在的靶点。