肠源性防御素在重症中暑肠道病变中作用机制的研究

我们前期研究发现，在重症中暑动物模型，肠道的病理损伤程度与热打击强度、降温治疗时机及动物模型预后有关，并通过蛋白质组学的方法对肠道的差异表达蛋白进行了分离鉴定，发现源于肠道潘氏细胞的α防御素（Cry-2）表达上调。为了深入研究具有杀菌、抗/促炎、肠道免疫和诱导凋亡功能的肠源性防御素在重症中暑肠道病变中的作用，我们拟通过中暑动物模型、离体肠段和细胞热打击模型三个层面，研究中暑热打击（同时模拟在体肠腔内环境联合内毒素刺激）对肠源性防御素表达分泌的调节机制、肠源性防御素对肠道炎症反应、肠上皮细胞损伤及肠屏障通透性的影响，并通过应用针对肠道保护的干预措施（包括抗炎、营养、膜保护等），从正反双向阐明肠源性防御素在重症中暑肠道病变中的作用机制，为临床从肠道病变角度出发，有针对性的防治重症中暑病情进展以降低其病死率和后遗症发生率提供实验依据。

在项目实施期间，围绕重症中暑肠道损伤的分子机制及干预措施展开研究，项目工作情况包括：（1）在原有认识的基础上，结合研究发现和最新研究进展，对重症疾病肠功能障碍的分子机制和中暑对肠粘膜机械屏障功能变化的影响进行综述；（2）在中暑动物模型发现肠源性α防御素（Cry-2）与中暑小鼠肠道病变，包括组织损伤程度、通透性增高相关，并且在降温处理条件下也与肠道损伤程度保持一致，而乌司他丁抗炎处理则可明显减轻热打击对肠道的组织损伤、减低组织和血清中肠源性Cry-2的水平；（3）在中暑动物模型，还发现热打击导致的肠道通透性增加、细菌移位和内毒素血症部分是通过蛋白酶激活受体1(PAR1)信号通路介导的，并且肠上皮细胞通透性增加可能在其中发挥重要作用；（4）基于肠上皮细胞的热打击模型研究发现，热打击(同时模拟在体肠腔内环境联合内毒素刺激）可引起肠上皮细胞损伤，包括可导致细胞的凋亡和死亡，而异丙酚对肠上皮细胞的热损伤起保护作用，且其可能是通过高迁移率族蛋白B1（HMGB1）来发挥作用；（5）研究还发现，热打击还可导致肠上皮细胞间紧密连接的破坏，而二十碳五烯酸（EPA） 能有效保护热打击引起的肠上皮细胞通透性的增高和上皮细胞紧密连接屏障的破坏。（6）基于上述研究发现，项目共发表论文8篇，其中SCI论文4篇，中文核心期刊论著2篇，综述2篇，另通过本项目研究毕业博士1名，硕士1名，资助加拿大高级访问学者1名。