细胞外HSP70/HSP70-PCs对肝癌细胞增殖影响的机制研究

迄今为止，探讨细胞外HSP70/HSP70-PCs对肿瘤细胞生长的影响及机制的研究在国内外未见报道。我们的前期研究发现细胞外HSP70/HSP70-PCs可以促进肝癌细胞的体外增殖。本项目欲在前期研究的基础上，应用RNAi、EMSA、质粒转染、报告基因技术以及real-time RT-PCR、Western Blot等分子生物学技术，探讨细胞外HSP70/HSP70-PCs如何实现跨膜转导，细胞内信号转导，进而活化转录因子后调控哪些效应因子的表达，最终影响肝癌细胞的增殖活性。本项目的成功不仅可以为完善肝癌发生发展的分子生物学机理提供可靠的理论基础，同时必将为开发相应的治疗策略、改善肝癌的治疗效果开辟一条崭新的路径。

肝细胞癌是最常见的恶性肿瘤之一，占全世界癌症死亡原因的第三位。目前我国，肝癌占癌症死亡原因的第二位，死亡率约26.26/10万人。慢性肝损害刺激肝细胞过度增殖是肝细胞肝癌发生的主要病理机制。热休克蛋白70，广泛存在于原核、真核细胞中。它在肿瘤中既可以作为肽的运载工具，发挥“分子伴侣”的作用，也可以参与肿瘤细胞内的信号调节，调控多种肿瘤相关蛋白，包括Wnt，P53，Rb，HIF-1α等。HSP70主要表达在细胞浆，能被多种肿瘤细胞释放到细胞外。研究发现，释放到肿瘤肿瘤微环境中的HSP70及HSP70肽复合物能够活化树突细胞，调节肿瘤免疫反应。而且，细胞外HSP70/HSP70-PCs还能调控调控肿瘤的多种生物学行为。我们的研究主要探讨细胞外HSP70/HSP70-PCs如何实现跨膜转导，细胞内信号转导，进而活化转录因子后调控哪些效应基因的表达，最终调控肝癌细胞的增殖活性，为阐明HCC的发生发展机制和开发新的临床治疗策略提供分子水平的理论基础。我们不仅完成了计划中细胞外HSP70/HSP70-PCs对肝癌增殖及其机制的研究，还进一步研究并发现了细胞外HSP70/HSP70-PCs对侵袭以及上皮间质转化的影响及其机制。作为课题的扩展，我们进一步研究了LPS对肝癌、胆管癌细胞的影响EMT的发生的影响及其机制。并且探讨了肝癌Glut1与VEGF的表达的影响。这些结果为揭示肝癌、胆管癌的发生发展机制提供理论基础。MicroRNA是近年研究的热点，我们在项目资助的过程中还研究了mi-RNAs对肝癌的影响。我们的研究发现，雷公藤红素在抑制肝癌侵袭转移的过程中，miR-224发挥重要的作用。我们还检测了miR-488与miR-200b、miR-200c对肝癌的影响。进一步在表观遗传的角度揭示了肝癌的发生发展，为肝癌的治疗及预防提供新的思路。