基于印迹定向捕获环烯醚萜苷药效组分群的六味地黄丸质量评价研究

Multi-component quantification is more rigorous than analysis of a single active ingredient in the quality control of traditional Chinese medicines. To establish a rapid, sensitive, simple target enrichment technology is of great significance for traditional Chinese medicines quality control. Aiming at the targeted enrichment of active components alignment of glycosides, this research attempts to synthesize double- vinyl glycoside water-soluble monomers characterized with varied imprinting action sites. To reveal imprinting mechanism between templates and functional monomers and screen the suitable molecular imprinted assembling system, important physicochemical parameters for weak interactions between templates and functional monomers will be computationally studied, used iridoid glycosides in Liu Wei Di Huang Wan as templates. Afterwards, molecular imprinted microspheres will be prepared by the precipitation polymerization. Furthermore, the mechanisms of adsorption separation in water medium will be investigated and a rapid detection method for active components alignment of iridoid glycosides in Liu Wei Di Huang Wan will be established. This work will provide an alternative functional monomers for imprinting high polar drug efficacy materials. Moreover, the regulatory role of vinyl monomer structure to the properties of molecular imprinted materials will be identified. This work will also provide the theory basis for perfecting Chinese medicine standard.

药效组分群质量评价模式替代单组分质量评价模式已成为中药质量评价方法的发展趋势，建立快速、灵敏、简单的靶向富集技术对中药质量评价具有重大意义。本项目拟以快速靶向富集糖苷药效组分群为目标，设计有不同印迹作用位点的双乙烯基亲水性功能单体，以六味地黄丸中常见环烯醚萜苷为模板，利用计算机分子模拟技术研究“模板-功能单体”间弱相互作用的重要物理化学参数，阐明目标分子与功能单体之间的印迹作用机理，指导筛选分子印迹预组装体系。采用沉淀聚合制备印迹微球，研究水介质中印迹材料的靶向识别过程，深入探讨分子印迹吸附分离机制。通过本项研究，将探索水介质中高极性化合物的印迹吸附问题，明确双乙烯基功能单体结构与印迹材料识别性能的关系，揭示印迹所用机理，阐明靶向分离机制，为建立六味地黄丸环烯醚萜苷药效组分群质量评价模式提供理论依据。

本研究工作基本按计划执行。合成两种乙烯基糖类功能单体（烯丙基葡萄糖与双乙烯基半乳糖），并以此为分子印迹功能单体，完成以下研究内容：. （1）将双乙烯基半乳糖作为功能单体和交联剂，以马钱苷作为假模版分子，在二甲亚砜中采用本体聚合制备超亲水印迹聚合物。通过一系列吸附实验表明，印迹聚合物对环烯醚萜类化合物具有良好的吸附容量与优异的选择性。以六味地黄丸为研究对象，系统研究了分子印迹固相萃取条件。同时，利用分子印迹固相萃取联用高效液相色谱的方法检测六味地黄丸中马钱苷，莫诺苷，甲氧基莫诺苷和乙氧基莫诺苷等四种环烯醚萜苷，建立的检测方法具有良好的线性范围、较低的检出限、良好的精密度与准确度，可以应用于六味地黄丸中环烯醚萜苷类活性成分的分析检测。. （2）采用沉淀聚合，以烯丙基葡萄糖作为功能单体，以马钱苷作为假模版分子，合成微米级亲水性单分散印迹微球。采用分子印迹固相萃取法从山茱萸中选择性富集马钱苷、莫诺苷、马钱苷酸、甲氧基莫诺苷、乙氧基莫诺苷等五种环烯醚萜苷，建立了山茱萸中环烯醚萜苷药效组分群的印迹固相萃取联用高效液相色谱检测方法，线性范围为0.02-100mg/g，定量限为0.01-0.015mg/g，加标回收率为80.0-94.0%，所建立的 检测方法具有快速、高选择性、高灵敏度等优点。. （3）通过吸附模型实验，揭示了水介质中环烯醚萜苷印迹吸附问题，明确了双乙烯基半乳糖与烯丙基葡萄糖功能单体结构与印迹材料识别性能的关系。. 本项目采用分子印迹样品前处理技术，实现六味地黄丸和山茱萸复杂样本中环烯醚萜苷类目标检测物快速、灵敏、简单的靶向富集，并建立了高效液相色谱检测方法，对实现高极性药效组分群复杂体系的精准检测并完善中药质量评价模式提供了理论依据与技术支撑。