硫色曲霉产β-甘露聚糖酶催化的分子机理及提高热稳定性研究

甘露聚糖是一种广泛存在于植物细胞壁中的半纤维素类多糖，饲料中的甘露聚糖能够引起动物的抗营养作用，影响营养物质的消化和吸收。在饲料中添加β-甘露聚糖酶是解决甘露聚糖抗营养作用的重要手段。在现有研究工作的基础上，纯化硫色曲霉产β-甘露聚糖酶和细菌表达的重组酶，进行酶学特性比较分析；在原核表达载体上，定点突变分析，确定酶的催化区、底物结合区和结构稳定区，定位关键氨基酸残基的位点，从而阐明酶催化的分子机理；利用基因重组技术，对酶的分子结构进行改造以提高热稳定性；构建毕赤酵母高效分泌表达的基因工程菌株，对发酵条件进行摸索。所获得结果不仅可以为β-甘露聚糖酶的工业化生产奠定基础，而且可以为类似的蛋白质工程研究提供重要的科学依据。