新型MRSA基因工程多价亚单位疫苗保护性细胞免疫应答谱学特征分析与鉴定

research on neotype genetic engineering multivalent subunit vaccine based multiplicity of infection and pathogenic mechanism of methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) is the most significance to control the increasingly serious MRSA infection and the explosive popularity. Presently, reasonably select antigen and deeply repersent immunoprotection mechanism, especially ignoring the critical role of innate immunity and acquired cellular immunity response in the immunoprotection are the main restricts of vaccine study. Our group identificated and builded MRSA genetic engineering multivalent subunit vaccine by employing high-flux immunodominance antigen screening method in the last phase, and focused on the study of immunoprotective effect which mediated by antibody. To further investigated the mechanism of celluar immunity response, we will overally and systematically analyze immunoprotective effect and response mechanism from innate immunity and acquired celluar immunity in the MRSA vaccine by transcription, protein, celluar and entirety level, for the further understand MRSA infection pathogenic and acknowlege immunoprotection mechanism, affording experiment foundation for design more safety and effective MRSA genetic engineering multivalent subunit vaccine.

针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的多重感染及致病机制研发新型的基因工程多价亚单位疫苗，对有效控制日趋严峻的MRSA耐药性发展和爆发流行具有重要意义。目前制约疫苗研究的主要瓶颈是抗原组分的合理选择及免疫保护机制的深入阐明，尤其是忽略了天然免疫及获得性细胞免疫应答在免疫保护中的关键作用。课题组前期在通过"高通量免疫优势抗原组学"技术筛选鉴定并优化构建了MRSA基因工程多价亚单位疫苗基础上，重点针对抗体介导的免疫保护作用进行了研究。为进一步深入阐明该疫苗的保护性细胞免疫应答机制，本课题拟通过转录水平、蛋白水平、细胞水平及整体水平全面、系统地分析天然免疫及获得性细胞免疫应答在MRSA疫苗中的免疫保护作用及其应答机制，为深化对MRSA感染致病机制的理解，增强对MRSA感染免疫保护机制的认识，合理设计更加安全、有效的MRSA基因工程疫苗提供重要的实验基础。

临床MRSA感染及耐药性发展已日趋严重，面临“无药可治”的严峻挑战。针对MRSA的多重感染及致病机制，研发新型MRSA基因工程多价亚单位疫苗的免疫防控策略已得到广泛共识。本课题组应用反向疫苗学及高通量抗原筛选等技术，从金黄色葡萄球菌全基因组2742个开放阅读框（ORFs）中成功筛选到5种保护性抗原，通过毒素分子的去毒突变、分子融合、多组分优化、制剂配伍，成功研制含有上述5种保护性抗原的四亚单位（HI、SpA5、mSEB、MntC）重组金黄色葡萄球菌疫苗。2015年6月获批CFDAⅠ、Ⅱ、Ⅲ期临床研究批件（批件号：2015L01247）。2016年6月至2017年4月在江苏泰兴开展了174名健康志愿者的Ⅰ期临床试验，期间同时采用ELISA技术检测血清特异性抗体效价、Luminex技术检测血清特异性抗体浓度、OPK技术检测血清功能性抗体吞噬杀菌水平、Elispot技术检测特异性细胞免疫应答水平，系统地分析评价了特异性体液免疫及细胞免疫应答在MRSA多价亚单位疫苗中的免疫保护作用及其应答机制，为深化对MRSA感染致病机制的理解，增强对MRSA感染免疫保护机制的认识，合理设计更加安全、有效的MRSA基因工程疫苗提供了重要的临床研究资料。