不明原因复发性自然流产母胎界面免疫微环境失衡机制研究及靶向干预

不明原因复发性自然流产（URSA）的发生多与免疫因素有关,其中母胎界面免疫耐受微环境Th1/Th2 细胞因子网络平衡起着重要作用，该平衡被打破将导致流产发生。课题组在前期研究中发现，正常孕妇外周血单核细胞（PBMC）中高表达一种新的细胞免疫抑制因子Tim-3，而URSA孕妇PBMC中表达水平较低，从而高度提示Tim-3 表达水平低下或缺失可能与URSA发生有关，这一现象可能是一种新的妊娠免疫耐受失衡机制，在URSA的免疫发生机制中起关键作用。目前国内外均未见相关报道。因此，本项目拟从Tim-3这一全新视角出发，通过体内外实验和靶向干预，探讨Tim-3-galectin-9通路在母胎界面免疫耐受微环境失衡中的作用，旨在为URSA免疫发生机制研究提供一个新的思路，同时Tim-3及其配体gaLectin-9还有望成为新的免疫治疗靶分子，可能为URSA免疫干预和治疗提供一个新的切入点和研究基础。

研究发现母胎界面免疫耐受微环境Th1/Th2细胞因子网络平衡的打破与不明原因复发性自然流产（unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA）的发生密切相关。因此，对妊娠免疫耐受失衡机制的研究日益受到重视。本项目从Tim-3-galectin-9通路这一全新视角出发，通过体内外实验和靶向干预，探讨该通路在URSA母胎界面免疫耐受微环境失衡中的作用。研究要点包括：1.建立自然流产和正常妊娠动物模型，研究母胎界面蜕膜细胞及滋养细胞内Tim-3及其配体Gal-9的表达情况，以及Th1/Th2细胞因子水平；2.体外靶向干预研究Tim-3-galectin-9通路对抗原特异性T淋巴细胞免疫应答的调节机制；3.体内靶向干预验证Tim-3-galectin-9通路对维护母胎界面免疫耐受微环境平衡的作用。通过研究，本项目发现：1.母胎界面自然流产组tim-3总体是升高的，gal-9总体是降低的；2.自然流产组干预前淋巴细胞增殖率低于正常妊娠组，干预后自然流产组淋巴细胞增殖率升高，正常妊娠组降低；3.共培养干预前，自然流产组tim-3阳性表达高于正常妊娠组，gal-9阳性表达低于正常妊娠组，经tim-3-Ig干预后自然流产组和正常妊娠组的tim-3阳性表达均升高，经gal-9-Ig干预后自然流产组和正常妊娠组的gal-9阳性表达均升高；4.共培养未干预前自然流产组TH1细胞因子表达高于正常妊娠组，TH2细胞因子表达低于正常妊娠组，自然流产组干预后TH1细胞因子降低，TH2细胞因子升高，正常妊娠组干预后细胞因子变化无规律；5.体内靶向干预自然流产组后胚胎吸收率明显降低。