水稻条纹病毒NS2蛋白在病毒复制与运动中的协同作用机制

Rice stripe disease, caused by Rice stripe virus (RSV), is one of economically important diseases in rice. NS2, a RSV-encoded RNA silencing suppressor, is a nucleoplasm shuttle protein and interacts with Nicotiana benthamiana Fibrillarin2 (NbFib2). Because N. benthamiana can be infected by RSV, this project will use N. benthamiana as host to dissect the roles of interaction between NS2 and NbFib2 in RSV replication and transmission by employing virus-induced gene silencing (VIGS) technique. In addition, subcellular localization observation, BiFC and CO-IP methods will be used to determine whether NS2 and NScv4, a movement protein of RSV, cooperatively involve in cell-to-cell movement. The results will reveal the critical roles of NS2 during viral replication, and provide scientific basis for understanding the biological function of NS2.

水稻条纹病毒 (RSV) 引起的水稻条纹叶枯病是我国水稻生产中重要的病害之一，RSV编码的沉默抑制子NS2是一个核质穿梭蛋白，能与寄主本氏烟纤维蛋白 (NbFib2) 互作。本项目拟利用RSV可以侵染本氏烟的优点并结合病毒诱导的基因沉默 (VIGS) 技术，研究NS2与NbFib2互作在RSV病毒复制和扩散中的作用；通过亚细胞定位观察、双荧光互补 (BiFC)、免疫共沉淀 (CO-IP) 等方法弄清NS2作为穿梭蛋白是否协同RSV的运动蛋白NSvc4参与病毒的胞间运动。所获结果将揭示NS2在病毒复制和运动中的关键作用及其过程，为深入解析NS2的生物学功能提供科学依据。

水稻条纹叶枯病是重要的水稻病毒病之一，严重危害着我国水稻种植业，其病原物为水稻条纹病毒 (Rice stripe virus, RSV)，是纤细病毒属的代表成员。p2是水稻条纹病毒编码的沉默抑制子，是一个核质穿梭蛋白，与本氏烟纤维蛋白 (NbFib2) 互作。该项目围绕这一互作特点进一步研究p2的基因功能及在RSV侵染过程中的作用，所获结果如下：.1..p2的亚细胞定位存在动态变化，先入细胞核后出细胞核，证明p2是一个核质穿梭蛋白。.2..VIGS技术结合摩擦接种方法，证明p2和NbFib2均参与了RSV的侵染过程，这2个蛋白均作用于RSV复制和系统侵染的过程。.3..p2与拟南芥的柯浩体蛋白 (Atcoilin) 及其蛋白的2个功能域互作，推测p2可能需要借助柯浩体进行出核运动。.通过该项目的研究，明确了p2与NbFib2的功能即参与RSV的复制及系统侵染，同时，还发现p2与Atcoilin互作，为下一步深入研究p2的蛋白功能、入核和出核运动奠定了基础。