水稻条纹病毒p2“小体”在病毒复制与运动中的协同作用机制

Rice stripe disease, caused by Rice stripe virus (RSV), is one of economically important diseases in rice, p2，a RSV-encoded silencing suppressor, is a nucleoplasm shuttle protein. p2 plays a role in virus systemic infection through interacting with nucleolus and cajal bodies (CBs), CBs is dynamic structures, and always aid proteins to enter or exit the nucleus. Meanwhile, p2 interacts with OsSGS3, which is a significant factor of RDR6-mediated antiviral RNAi pathway, SGS3 binds RDR6 to small cytoplasmic bodies, designated siRNA bodies. On this basis, yeast two hybrid, co-localization and BiFC methods will be used to study the relationship between p2 and cell ＂bodies＂, CBs and siRNA bodies. Moreover, the roles of interactions during RSV infection will be dissected employing virus-induced gene silencing (VIGS) technique, western blot method and so on. The results will reveal the critical roles of p2 during viral replication, and provide scientific basis for understanding the biological function of p2.

水稻条纹病毒 (RSV) 引起的水稻条纹叶枯病是我国水稻生产中重要的病害之一，RSV编码的沉默抑制子p2是一个核质穿梭蛋白。p2通过与核仁和柯浩体 (cajal bodies, CBs) 互作来影响RSV的系统侵染，CBs是动态结构，常能协助蛋白完成出入细胞核的运动；同时，p2还能与水稻沉默抑制子SGS3互作，SGS3是RDR6介导的RNAi抗病途径的一个重要组分，两者在细胞质中聚合成siRNA bodies。本项目拟在此基础上，通过酵母双杂交、共定位和双荧光互补 (BiFC) 研究p2与细胞＂小体＂即CBs和siRNA bodies的互作，并结合病毒诱导基因沉默 (VIGS) 技术、western blot等方法，研究这些互作在RSV侵染中的作用。所获结果将揭示p2在病毒复制和运动中的关键作用及其过程，为深入解析p2的生物学功能提供科学依据。

水稻条纹病毒(rice stripe virus, RSV)引发的水稻条纹叶枯病是危害我国水稻产业的重要病害。p2是RSV编码的一个核质穿梭蛋白，与柯浩体蛋白和水稻沉默抑制子SGS3互作。本项目围绕这一中心进一步研究p2的亚细胞运动特征及其基因功能，所获结果如下：.1..获得本氏烟柯浩体指示蛋白coilin的基因全长序列并在NCBI上进行登录，生物信息学显示其具有柯浩体蛋白3个典型的功能域，系统发育树显示其隶属于植物coilin分支。.2..对p2氨基酸L富集区进行点突变，发现第102个氨基酸L是决定其入核的关键位点。.3..通过共定位实验发现p2与SGS3-RDR6 bodies互作.4..p2会影响SGS3、RDR6的表达，并可能作用于细胞自噬和泛素化途径。