一个功能未知的lncRNA：RNF139-AS1调控子宫肌瘤增殖的分子机制研究

RNF139-AS1, a novel long noncoding RNA of unknown function, which is significantly down-regulated in uterine leiomyoma by lncRNA microarray. Our previous study found that RNF139-AS1 was negatively related to the volume of leiomyoma and RNF139-AS1 over-expression inhibited proliferation and induced apoptosis in uterus leiomyoma cells (UtLMCs). Based on informatic analysis and experiments, RNF139 may be the target of RNF139-AS1. And further studies suggested that RNF139-AS1 may affect UtLMCs proliferation by regulating RNF139 protein expression through recruiting SUZ12. In this study, we will explicit the effect of RNF139-AS1 on proliferation in UtLMCs with over-expression and silence strategies. Besides, we will explore the potential mechanism of RNF139-AS1 interaction with RNF139 with RIP, RNA pull-down, luciferase reporter gene and ChIP techniques. Up to now, there is no report of RNF139-AS1 in uterine leiomyoma and this study may provide a theraputic target for the treatment of uterine leiomyoma.

RNF139-AS1是我们应用芯片技术筛选出的、显著低表达于子宫肌瘤组织的一条功能未知的lncRNA。前期发现：RNF139-AS1表达与子宫肌瘤大小成负相关，过表达RNF139-AS1可显著抑制子宫肌瘤细胞增殖、促进凋亡。生物信息学分析及实验提示RNF139可能是RNF139-AS1的下游靶标，进一步实验发现RNF139-AS1可能通过招募SUZ12蛋白调控RNF139的表达，进而影响子宫肌瘤细胞增殖。本研究拟采用过表达与敲低策略，评价RNF139-AS1对子宫肌瘤细胞增殖的影响；并通过RIP、RNA pull-down、荧光素酶报告基因、ChIP等技术，充分论证RNF139-AS1招募SUZ12对RNF139的调控进而影响子宫肌瘤的增殖的分子机制。目前有关RNF139-AS1在子宫肌瘤增殖中的功能与机制研究未见报道，本研究有源头创新性，并将可能为子宫肌瘤的防治提供潜在干预靶标。

子宫肌瘤是育龄女性最常见的盆腔良性肿瘤，发病率高达50%。子宫肌瘤是由于子宫平滑肌细胞过度增殖所致，同时也是甾体类性激素依赖性疾病，然而现有研究仍不足以阐明其发病机制。近年来，在子宫肌瘤中lncRNA相关研究尚少，因此从lncRNA角度研究其发生发展，可为其临床诊疗和防治提供新的思路和靶标。.本研究通过lncRNA芯片技术筛选出子宫肌瘤组织中差异表达的lncRNAs，进一步以RNF139-AS1为研究对象，初步探索其在子宫肌瘤中生物学特征、在细胞水平对子宫肌瘤细胞的增殖效应，结果提示RNF39-AS1是一条在子宫肌瘤中低表达的lncRNA，但与雌激素参与的子宫肌瘤增殖效应无明显相关。同时对子宫肌瘤组织样本进行全转录组测序，分析子宫肌瘤中的lncRNA、circRNA、miRNA和mRNA的差异表达基因并进行GO分析、KEGG通路分析及网络调控分析，同时进行组织验证，结果提示与测序结果趋势一致。此外，通过多变量逻辑回归模型、加权分位数和(WQS)回归和采用BKMR回归模型，研究环境内分泌干扰物与子宫平滑肌瘤(UL)和子宫内膜异位症(EM)之间的总体关系。结果提示，人群数据分析发现单化学分析、WQS回归和BKMR模型提示雌马酚和汞是与UL相关最显著的化学物，同时MCPP、MBZP和MEHP也与UL相关；不同暴露组中单一化学物均未显示与EM显著相关，但WQS指数与EM呈轻微正相关，且在与绝经前妇女的亚分析中发现显著正相关。.本研究通过初步研究 RNF39-AS1和环境内分泌干扰物在子宫肌瘤进展中的作用，增加了人们对 lncRNA和环境内分泌干扰物在子宫肌瘤发展中作用的理解，为其临床防治提供了新的思路和干预靶点，具有潜在的临床应用价值。但鉴于lncRNA在肿瘤调控中的复杂性，本项目组将继续深入探讨验证后的lncRNA在子宫肌瘤中的增殖效应和可能的分子机制。