靶向caspase-3蛋白酶药物体内筛选及评价体系的建立

基本信息
批准号:30901812
项目类别:青年科学基金项目
资助金额:22.00
负责人:张玉华
学科分类:
依托单位:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
批准年份:2009
结题年份:2012
起止时间:2010-01-01 - 2012-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:付秋霞,杜娟,王小慧,周勇,王礼翠,赵芳
关键词:
体内成像caspase3蛋白酶报告基因
结项摘要

缺乏理想的可以实时观测肝细胞凋亡的小动物实验模型, 不便于靶向caspase-3蛋白酶药物体内筛选及评价。本研究拟构建以荧光素酶为报告基因反映caspase-3蛋白酶活性的表达载体,通过水动力转染方法和噬菌体整合酶系统,将此载体整合到小鼠肝脏染色体上,建立caspase-3蛋白酶活性报告基因小鼠肝脏长期稳定表达模型,并应用活体荧光成像技术实时监测多种因素导致肝脏细胞凋亡引起蛋白酶caspase-3体内活性的变化,为体内研究caspase-3蛋白酶功能,以及以caspase-3蛋白酶为靶标的抗凋亡药物筛选及体内作用的稳定评价创造条件。也是探索一种以成年小鼠为基础的,建立目的基因体内表达模型动物实验体系的过程。

项目摘要

缺乏理想的可以实时观测肝细胞凋亡的小动物实验模型, 不便于靶向caspase-3蛋白酶药物体内筛选及评价。本研究构建了以荧光素酶为报告基因反映caspase-3蛋白酶活性的表达载体attB-ANLuc(DEVD)BCLuc,通过水动力转染方法和噬菌体整合酶系统,将此载体整合到小鼠肝脏染色体上,建立caspase-3蛋白酶活性报告基因小鼠肝脏长期稳定表达模型,并应用活体荧光成像技术实时监测多种因素(LPS/GalN或MHV-3诱导的肝损伤) 导致的细胞凋亡蛋白酶caspase-3体内活性的变化,为体内研究caspase-3蛋白酶功能,以及以caspase-3蛋白酶为靶标的抗凋亡药物体内作用的稳定评价及筛选创造条件。也是探索一种以成年小鼠为基础的,建立目的基因体内表达模型动物实验体系的过程。

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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