DDR1介导TAM活化调控人成釉细胞瘤上皮间质转化的机制研究

本研究分析盘状结构受体（DDR1）活化的肿瘤相关巨噬细胞（TAM）调控成釉细胞瘤（AB）上皮间质转化（EMT）机制；本项目首先分析DDR1+TAM和EMT转变关系；提取和纯化AB特异TAM，利用基因芯片技术筛选TAM差异表达基因；将TAM与永生化成釉细胞株共培养，体内/外实验观察它对EMT影响；构建包含人DDR1基因重组腺相关病毒载体和shRNA载体，基因0转染TAM，分别建立高/低表达DDR1基因TAM，共培养后体内/外实验观察DDR1基因上调/下调对巨噬细胞分化影响及对成釉细胞瘤EMT调控机制；构建高表达DDR1人巨噬细胞系U937，研究胶原活化DDR1介导TAM活化机制。本项目拟建立AB特异TAM基因表达谱，明确其活化调控EMT的机制，阐明细胞外基质对TAM诱导分化作用，探讨炎性微环境与AB形成和演进的信号传递，发现新信号传导通路和调节位点，确定新的肿瘤干扰阻断靶点。

本课题研究内容按预定进度安排如期进行， 取得了相应的结果。成釉细胞瘤是最常见的牙源性肿瘤，具有局部侵袭和易复发的生物学行为。由于其病因不明，缺乏有效的治疗措施，目前多采用手术切除，严重影响患者的生存质量。因此深入探讨该肿瘤侵袭转移机制，寻找新的预防措施和生物治疗途径具有重要意义。. 本研究分析盘状结构域受体酪氨酸激酶1（discodin domain receptor tyrosine kinases1，DDR1））活化的肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophages，TAM）调控成釉细胞瘤（AB）上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）的机制。首先分析DDR1+TAM和EMT转变关系；提取和纯化AB特异性TAM，利用基因芯片筛选TAM差异表达基因；将TAM与永生化成釉细胞株共培养，体内/外实验观察它对EMT影响；构建包含人DDR1基因重组腺相关病毒载体和shRNA载体，基因转染TAM，分别建立高/低表达DDR1基因TAM，共培养后体内/外实验观察DDR1基因上调/下调对巨噬细胞分化影响及对成釉细胞瘤EMT调控机制；构建高表达DDR1人巨噬细胞系U937，研究胶原活化DDR1介导TAM活化机制。结果TAM与DDR1表达与AB发生发展及预后密切相关，DDR1介导的TAM活化在调控AB侵袭性中发挥至关重要作用，DDR1介导并维持巨噬细胞向TAM活化，增强并诱导AB发生EMT。拟建立AB特异TAM基因表达谱，明确其活化调控EMT的机制，阐明细胞外基质对TAM诱导分化作用，探讨炎性微环境与AB形成与演进的信号传递，发现新信号传导通路和调节位点，确定新的肿瘤干扰阻断靶点。