DJ-1亚细胞定位在二烯丙基二硫抗急性髓系白血病中的分子机制研究

我们前期工作证明，二烯丙基二硫（diallyl disulfide, DADS）可有效地诱导人白血病HL-60细胞凋亡和分化，并运用蛋白质组学方法鉴定DADS诱导HL-60细胞的差异蛋白质18 种，其中（DJ-1 protein）DJ-1表达下调，DJ-1蛋白具有多种功能，其亚细胞定位与肿瘤的发生发展密切相关。本课题分别检测DJ-1在AML病人骨髓细胞胞浆和胞核中的表达，DADS处理后HL-60细胞中DJ-1的亚细胞定位变化，建立DJ-1定位表达和干扰表达重组细胞系，探讨DADS作用下DJ-1定位变化对白血病细胞生物学行为，PI3K-Akt、Ras-MAPK和JAK-STAT3信号通路的影响，证实DJ-1定位变化与DADS抗白血病作用及AML 发生发展相关，将为阐明DADS抗白血病分子机制，寻找抗白血病有效作用靶点及优化DADS抗肿瘤药效提供依据。

近来的研究表明，DJ-1在多种肿瘤中高表达。我们前期工作证明，二烯丙基二硫（diallyl disulfide, DADS）可有效地诱导人白血病HL-60细胞凋亡和分化，其中（DJ-1 protein）DJ-1表达下调。DJ-1蛋白具有多种功能，其亚细胞定位与肿瘤的发生、发展密切相关，DJ-1蛋白的核内高表达与预后差及肿瘤的侵袭有关。本课题检测DADS处理后HL-60细胞中DJ-1的亚细胞定位变化，应用siRNA干扰技术，观察DJ-1基因表达被干扰，建立DJ-1核定位高表达重组细胞系，探讨DADS作用下DJ-1表达变化对白血病细胞生物学行为及对Scr-Fak信号通路的影响。研究表明，1.25 mg•L-1DADS作用HL-60细胞后 DJ-1蛋白在胞浆中表达减少，而在胞核中表达量增加，出现了核转运现象，5.0 mg•L-1 、10.0 mg•L-1DADS作用HL-60细胞后DJ-1蛋白在线粒体中表达减少；siRNA干扰技术抑制DJ-1的表达，可增强DADS诱导HL-60细胞向成熟粒细胞系样分化；DJ-1核定位高表达具有促进HL-60细胞增殖和抑制HL-60细胞分化的作用，并促进其迁移和侵袭的作用；DADS诱导DJ-1核定位高表达的HL-60细胞分化及降低侵袭迁移；DADS通过Scr/Fak通路下调DJ-1，抑制DJ-1核定位高表达的HL-60细胞侵袭迁移。进一步的研究将证实DADS如何控制的DJ-1定位变化，又将怎样调控白血病的发生和发展，将为阐明DADS抗白血病分子机制，寻找抗白血病有效作用靶点及优化DADS抗肿瘤药效提供依据。