SALL4在NPMc+ 急性髓系白血病中的作用及分子机制研究

NPM1 is the most frequently mutated gene in acute myeloid leukemia and about 50-60% acute myeloid leukemia patients with normal karyotype has the mutation. The mutation cause cytoplasmic NPM1 localization (NPMc), so this specific acute myeloid leukemia was called NPMc+ AML. It was supposed that NPMc play oncogene roles on leukemogenesis, however, the roles of the NPMc in acute myeloid leukemia along with its leukemogenic potential are still under investigation. Our previous studies show that SALL4 is a novel NPMc-interacting protein. In this study, we will try to further narrow down the interaction domain of SALL4 and NPMc, observe the influence of SALL4 on NPMc function and stability, and demonstrate the precise molecular mechanism of SALL4 and NPMc in leukemogenesis. This study will contribute to a better understanding of leukemia development mechanism and provide new evidence that targeting SALL4 may be a promising therapeutic strategy for acute myeloid leukemia patients.

NPM1 基因是急性髓系白血病中突变率最高的基因，约50-60%的正常核型的急性髓系白血病患者中发生该基因突变。NPM1基因突变导致NPM1蛋白异常胞浆定位（NPMc），因而这种特殊类型白血病称为NPMc+ AML。目前研究认为NPMc 在白血病发生中发挥癌基因作用，但其参与肿瘤转化的具体分子机制还有待于深入研究。本课题组在前期研究中发现一个新的NPMc相互作用蛋白SALL4。本项目拟在前期工作基础上，鉴定SALL4与NPMc作用结构域，通过体内外实验明确SALL4与NPMc的相互作用，观察SALL4对NPMc功能及稳定性的影响，并采用一系列细胞模型及动物实验进一步阐明SALL4与NPMc在急性髓系白血病发生发展中的具体分子机制。研究结果将可能有助于进一步阐明白血病的发病机制，并有望发现新的急性白血病预后标志和治疗靶点。

原发耐药或复发是急性髓系白血病（AML）患者传统化疗失败的主要原因，寻找敏感特异的诊断、预后指标及治疗靶点，尽早诊断并实现个体化治疗是提高疗效的重要手段。本项课题采用Matrigel侵袭实验、免疫印迹等，研究了miR-125b急性髓细胞白血病细胞生物学功能及作用信号途径，发现miR-125b 可以通过抑制NF-κB信号通路抑制急性髓细胞白血病细胞的增殖和侵袭及迁移能力，发生G2/M期阻滞，促进急性髓细胞白血病细胞的凋亡。同时采用生物信息学软件预测、通量的MassARRAY时间飞行质谱技术、双荧光报告系统检测研究了传统主要化疗药物代谢通路相关基因的miRNA结合位点多态性与预后的相关性，发现多态性位点可通过影响miRNA与靶mRNA结合，负调控基因表达，提示miRNA及结合位点多态性在AML发生发展及药物治疗中发挥重要作用，有望成为AML个体化治疗的新靶点。相关成果已发表SCI论文2篇，具体研究结果如下:.1. 体外实验证实 miR-125b 可以抑制急性髓细胞白血病细胞的增殖和侵袭及迁移能力，发生G2/M期阻滞，促进急性髓细胞白血病细胞的凋亡。.2. miR-125b能够有效抑制急性髓细胞白血病Kg1a和HL60细胞增殖，促进凋亡是通过抑制NF-κB信号通路。.3. 阿糖胞苷代谢通路相关基因的miRNA结合位点多态性与AML患者诱导化疗后CR率、OS及RFS相关，有望成为判断AML患者预后的新指标。.4. 蒽环类药物代谢通路相关基因的miRNA结合位点多态性与AML患者化疗后发生骨髓抑制、胃肠道反应及心脏毒性相关，可能成为AML患者化疗后不良反应的预测因子。.5. 多态性位点rs3734703、rs8139分别通过影响miRNA-5194、miRNA-373-3p与靶mRNA结合，负调控基因SLC29A1、NT5C2的表达，提示miRNA结合位点多态性在AML药物治疗中发挥着重要作用。