靶向调控ActRIP5表达对实验性肝损伤发生发展的影响及其机制研究

Exploring effective therapeutic targets has been always a hot spot in the research of liver fibrosis. Activin, as an important factor inducing liver fibrosis, has been paid close attention by more and more researchers. But the mechanism of the effect of Activin in liver is still unclear. Activin receptor interacting protein 5 (ActRIP5) is Activin specific signal transduction protein which is our newly cloned. Our studies showed that ActRIP5 express highly in liver cells and promote Activin signal transduction and increase Activin-induced extracellular matrix production through acting with Activin II receptor. If ActRIP5 was blocked, the Activin signal transduction can be cut off specificly. So in our studies, we will explore the specific signal transduction effect of apoptosis and regeneration of liver cells mediated by ActRIP5. The mechanism of the regulating liver fibrosis of ActRIP5 will be explained through analysis of hepatic stellate cells secreting excellular matrix and Kupffer cell secreting inflammatory cytokines. Using specific molecule targeted ActRIP5 to mice liver to explore its treatment of liver fibrosis and reveal its mechanism of regulating liver fibrosis as a key molecule, and lay the research foundation to seek new gene target of prevention and cure of liver fibrosis.

探求有效的治疗靶点一直是肝纤维化研究工作的热点，激活素作为诱导肝纤维化形成的重要因子正被更多的学者所关注，但介导激活素在肝脏作用的关键信号分子仍未确定。激活素受体相互作用蛋白5（AcRIP5）是我们新克隆的激活素特异信号传导蛋白，我们的研究发现ActRIP5在肝细胞高表达，可通过与激活素II型受体作用，促进激活素信号传导、增加激活素诱导的细胞外基质产生，如能阻断ActRIP5的作用，即可特异性切断激活素信号传导。因此本研究拟通过急性及慢性肝损伤模型，探讨ActRIP5介导激活素调控肝细胞凋亡及再生的特异信号传导作用，通过分析肝星形细胞分泌细胞外基质及枯否细胞分泌炎性因子阐述其调控肝纤维化发生发展的作用机制，利用特异分子将ActRIP5 siRNA靶向导入小鼠肝脏，探讨其对肝纤维化的治疗作用。最终揭示ActRIP5作为关键分子调控肝纤维化形成的机制，为寻求新的肝纤维化基因防治靶点奠定研究基础

探求有效的治疗靶点一直是肝纤维化研究工作的热点，激活素作为诱导肝纤维化形成的重要因子正被更多的学者所关注，阻断激活素在肝内的信号传导，可能有效控制肝纤维化发生发展，激活素受体相互作用蛋白5（AcRIP5）是我们新克隆的激活素特异信号传导蛋白，其在肝内高表达具有促进激活素信号传导的作用。因此本研究主要以AcRIP5为靶点，通过刀豆蛋白A构建免疫性急性及慢性肝损伤动物模型，探讨激活素A及其信号传导在免疫性肝损伤发生发展过程中的作用，通过慢病毒介导将ActRIP5- shRNA导入小鼠肝脏，靶向控制ActRIP5在肝脏的表达，探讨其对肝纤维化的治疗作用，通过体外试验探讨ActRIP5 介导激活素调控肝细胞凋亡、诱导肝星形细胞活化的特异信号传导作用。研究结果表明在ConA诱导的免疫性急性及慢性肝损伤进程中都有Activin A, 激活素II A型受体(ACVR2A), ActRIP5的异常高表达，以Activin A中和抗体、基因沉默激活素II A型受体等体内阻断实验动物肝细胞外的激活素信号传导可以抑制肝损伤发展；采用具有较强的抗炎抗氧化功效的Magnolol 给药，也可以通过调控激活素在肝组织的信号传导，而达到其抗肝纤维化的作用。靶向控制肝内ActRIP5的表达可以有效抑制模型动物免疫性肝损伤的进展和肝纤维化的形成； ActRIP5可通过与ACVR2A作用，增加激活素诱导的肝细胞凋亡和细胞外基质产生，阻断ActRIP5 的作用，可特异性切断激活素信号传导、抑制激活素诱导的肝细胞凋亡和肝星形细胞活化细胞外基质的产生。研究结论：激活素及其信号传导参与了ConA诱导的免疫性肝损伤的发生进程和纤维化形成；ActRIP5 作为肝内激活素特异的信号传导分子，靶向控制其在肝内的表达可以有效阻断激活素在肝脏的信号传导，调控肝纤维化的发生发展。ActRIP5可作为新的肝纤维化基因防治靶点。