纳米技术导向性激活CRMP4基因表达抑制前列腺癌转移的研究

肿瘤转移是癌症患者的重要致死因素。有本课题负责人参与的近期研究发现在前列腺癌转移灶组织中，脑衰蛋白反应调节蛋白（CRMP4）的表达显著低于原发癌，而超表达CRMP4蛋白能有效抑制前列腺癌细胞的体外侵袭性与体内远处转移，证明CRMP4是一种前列腺癌转移抑制基因，是靶向治疗的优选靶点。本课题拟采用基于全新的"RNA激活"理论而开发的基因表达增强技术来增强前列腺癌细胞CRMP4基因的表达，从而抑制前列腺癌的转移。该技术采用一种特异性作用于基因启动子的小双链激活RNA，在转录水平上持久诱导靶细胞自身基因的表达。经过体外细胞实验和在体裸鼠移植瘤试验，筛选并鉴定出高效能的CRMP4特异性小双链激活RNA。为了减少对其他组织的非特异性影响，小双链激活RNA表达质粒将包被在多聚物纳米颗粒体系中，纳米颗粒表面再经过前列腺癌特异性膜抗原核酸适配子耦联，使纳米颗粒特异性地导向到前列腺癌细胞，建立靶向型基因疗法。

本研究的目的是探索抑制前列腺癌转移的新治疗方案，用与基因启动子互补的小双链RNA激活癌症抑制基因的转录。本课题的靶向癌症抑制基因是二氢嘧啶酶-3（DPYSL3，蛋白名为CRMP4, 即脑衰蛋白反应介导蛋白-4），是一种前列腺癌转移抑制因子。今年是本课题实施的第四年度，按照标书的计划，我们全部完成了研究目标，分析了多种前列腺癌细胞系中DPYSL3 基因/CRMP4蛋白的表达情况，合成并检测了22种 saRNA对DPYSL3 mRNA和CRMP4蛋白水平的调控作用，确定了一个最有效的saRNA，在体外细胞培养以及体内裸鼠异质瘤模型中对肿瘤转移的抑制效果。我们还初步分析了saRNA对基因调控的分子机制以及与细胞移动相关RhoA蛋白激酶的相互关联。