分子伴侣辅因子CHIP与帕金森病PINK1蛋白的相互作用及CHIP对PINK1的泛素化调节作用研究

我们的前期研究发现与帕金森病相关的PINK1蛋白可以通过泛素-蛋白酶体通路（UPP）降解，但介导该过程的E3酶并不清楚。我们进一步应用酵母双杂交技术分离并鉴定了PINK1蛋白的一个相互作用蛋白-热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白（carboxyl terminus of the Hsc70- interacting protein,CHIP）；而CHIP是一个E3泛素-蛋白连接酶，可介导许多神经退行性疾病相关蛋白质的降解。在此工作基础上，本课题拟采用免疫共沉淀、免疫双标共定位等技术鉴定CHIP与PINK1在哺乳动物细胞内的相互作用及相互作用结构域；采用体内及体外泛素化检测、脉冲追踪实验等技术研究CHIP对PINK1的泛素化调节作用，本研究有望进一步明确PINK1基因的功能及其在帕金森病发病中的分子作用机制，为今后帕金森病的早期诊断和治疗研究提供理论依据。