酵母细胞囊泡形成复合体的结构生物学研究

As the primary eukaryotic organelles substances transfer mechanism, vesicle trafficking plays an irreplaceable important role in eukaryotic life processes. The applicant and his research group always focused on the structure studies on the eukaryotic vesicle trafficking, in particular, the newborn vesicle formation, and has got a number of important research progress of it.The applicant hopes to get the financial support from the National Natural Science Foundation of China, and further studies the whole process of vesicle formation, such as the structure of the late endosome vesicle formation complex : ENT3-VTI1-PEP12-SYN8- GGA2. The interaction information obout above complex would be helpful for clarifying the mechanism for this Cargo-Complex Containing newborn vesicle formation process.

囊泡运输作为真核生物细胞器间的主要物质传递方式，在真核生物生命过程中发挥着不可替代的重要作用。申请人及所领导的研究组拟在国家自然科学基金的经费支持下，以完整囊泡形成体系为研究对象，尝试解析酵母细胞中以货物蛋白复合体VTI1-PEP12-SYN8为核心，以ENT3蛋白为质膜-货物接头蛋白、以GGA2为货物-Clathrin接头蛋白的新生囊泡复合物三维结构，揭示上述复合物中存在的蛋白质-蛋白质及蛋白质-质膜相互作用关系；结合生物化学及细胞生物学技术手段阐明上述复合物及各功能组件的具体功能及分子机制；阐明酵母细胞该复杂货物蛋白运输囊泡形成机制。

囊泡运输作为真核生物细胞器间的主要物质传递方式，在真核生物生命过程中发挥着不可替代的重要作用。在项目执行期间，我们以酵母囊泡转运过程中货物蛋白复合体VTI1-PEP12-SYN8 为核心，完成了VTI1、PEP12、SYN8、ENT3、GGA2 五种蛋白蛋白的克隆、表达及相互作用关系研究，实现了多种亚复合物的体外组装及晶体学研究。同时我们还完成了GGA1蛋白的VHS、GAT和GAE结构域、ENT5_[A/E]NTH结构域的结构与功能关系研究，为深入理解酵母细胞复杂货物蛋白运输囊泡形成机制提供了重要的生物化学和结构生物学证据。项目执行期间，共发表标注有资助号的SCI研究论文18篇，培养了5名博士，较好的完成了预定研究目标。