真核基因转录后调控过程相关蛋白质及其复合物的结构生物学研究

转录后调控是真核基因表达调控过程的重要环节，但由于参与该过程的的效应因子众多、运作过程复杂、相互作用关系不确定，该过程的运作模式及分子机理一直未能得以阐明。项目申请人以真核转录后调控过程中发挥重要功能的内含子剪切因子RES复合物及mRNA降解抑制因子Pub1为研究对象，利用结构生物学手段分别解析RES复合物整体和各单体间蛋白质-蛋白质复合物结构，以及Pub1蛋白RRM2及RRM1+RRM2片段与polyU序列之间的蛋白质-核酸复合物结构，进而阐明以上功能复合物的组装及运作模式，为真核转录后调控过程精细运作机制的最终阐明提供更多的结构生物学依据。

项目执行期间，我们成功完成了RES Complex 中Snu17p/Bud13p和Snu17p/Pml1p 二元复合物，以及Snu17p/Bud13p/ Pml1p 三元复合物的体外组装，复合物晶体生长工作尚在进行中；成功完成了Pub1 蛋白RRM2 及RRM1-RRM2 片段的结晶及三维结构解析，并通过Pub1 蛋白RRM2 及RRM1-RRM2 片段与polyU 之间的相互作用关系研究，揭示Pub1 与polyU之间存在超强相互作用的分子机理；除此之外，我们还完成了Pub1蛋白人源同源蛋白HuR RRM1-RRM2的复合物三维结构，揭示了该类型结合蛋白对mRNA结合模式的保守性。项目共资助发表SCI研究论文16篇，圆满完成项目计划任务目标。