TLR4基因3'UTR遗传多态在云南汉族、哈尼族、藏族高血压疾病发生中的作用及机制研究

Hypertension is one of the most common cardiovascular diseases. Human TLR proteins, the family of innate immune recognition receptors, play an important role in defense of infections. Current evidence suggests that chronic inflammation mediated by TLR4, which is a member of TLRs, may influence the initiation and development of hypertension. However, the correlation research between TLR4 and hypertension is still few, and the biological function of TLR4 on hypertension remains unclear. Our previous studies showed that part of the TLR4 gene 3’untranslated region (3’UTR) single nucleotide polymorphisms（SNP）may exert significant influence on hypertension. And the data from epidemiological investigation give the result that the morbidity of hypertension is quite different among minorities. Thus, by taking Yunnan Hani(low hypertension morbidity) , Han(mean hypertension morbidity) and Zang (high hypertension morbidity) populations as research objects, we try to confirm whether the SNPs of TLR4 3’UTR influence hypertension and compare the TLR4 protein and mRNA expression in different nationality hypertension patients. Further, using double-fluorescence reporter system, we try to observe the impact of TLR4 3’UTR SNPs on luciferase gene expression with the aim of exploring the mechanism of how these SNPs making influence to hypertension .The porpose of this study was to provide more theoretics basis to the clinical treatment of hypertension．

高血压是最常见的心血管疾病。人类天然免疫受体TLR4在机体感染防御中意义重大，它所介导的炎症反应对高血压的发生、发展有着不容忽视的作用。我们前期研究发现：TLR4基因3’UTR区域的遗传突变（单核苷酸多态）与云南人群的高血压密切相关，且存在一定的民族差异；部分少数民族在高血压发病率上也存在明显差异。目前，有关TLR4对高血压发生、发展的作用研究报道较少，特别作用机制尚不明了。鉴于此，本研究拟选择三个在高血压发病率表现上有明显差异的民族——哈尼族（低发病率）、汉族（平均发病率）和藏族（高发病率），进行TLR4基因3’UTR区域单核苷酸遗传多态对不同民族间高血压影响作用的差异比较，探讨该区域遗传多态对TLR4基因转录和蛋白表达的影响及其可能的影响机制，揭示基于TLR4基因的民族间高血压发病易感性差异的分子基础，为通过调控TLR4信号通路，靶向TLRs的生物治疗策略制定提供思路和理论依据。

云南部分少数民族在高血压发病率上存在明显差异。TLR4介导的炎症反应对高血压有着不容忽视的影响，其3’UTR的遗传突变与云南人群的高血压密切相关，且存在一定的民族差异。 . 本研究以在高血压发病率上有显著差异的哈尼、彝、藏和汉族人群作为研究对象，进行TLR4 3’UTR区SNP对不同民族间高血压影响作用的差异比较，探讨该区域SNP对TLR4转录和蛋白表达的影响及机制，揭示基于TLR4基因的民族间高血压发病易感性差异的分子基础。此外，项目还对中国北方和南方汉族、傣族、越南和日本5个东亚人群TLR4 3’UTR的遗传变异信息进行了比较分析。取得以下结果：.1. 云南汉、彝、哈尼人群的TLR4 3’UTR区存在遗传变异差异。rs41426344、rs7869402、rs11536889、rs7873784和rs11536891等SNP位点的等位基因和基因型在三个不同民族人群中存在显著差异。.2. TLR4 3’UTR遗传变异对汉、彝、哈尼人群高血压存在影响差异，这些突变差异可能是导致云南不同民族对高血压易感差异（汉族人群相对于彝族和哈尼族高发）的遗传基础之一。其中，rs60972665、rs7873784和rs11536891是开展云南汉族人群与原发性高血压相关研究尤为需要重点关注的位点。.3.分别构建了上述SNP位点及基于人源TLR4基因非编码区全长的双荧光素酶报告质粒，实现了TLR4 3’UTR 6个多态位点的定点突变，并在细胞水平进行了6个目标SNP位点对TLR4基因表达的影响研究。结果显示，TLR4 3’UTR区rs11536889的“T”等位基因和rs7869402的“C”等位基因通过对TLR4表达的上调产生对包括高血压在内的炎性疾病的影响。.4. TLR4 3’UTR区的 rs41426344、rs7869402、rs11536889、rs7873784、rs11536891和rs11536896 SNP位点为中国南、北方汉族，傣族，越南和日本人群共有；rs60972665为北方汉族、越南和日本人群共有；rs186969949为除越南外的其他4个人群共有。而且，在5个东亚人群中，rs7873784、rs11536891和rs11536896完全连锁。.该研究为靶向 TLRs 的高血压治疗策略提供了理论参考，丰富了TLR4基因在不同人群中的遗传结构差异信息。