VEGF基因3'UTR区基因多态性和相关microRNA在肺癌中的作用研究

血管内皮生长因子(VEGF)是一种对血管生成有诱导作用的蛋白。新近研究证实VEGF基因3'非翻译区（3'UTR区）的+936C/T多态在肺癌的易感性中发挥重要作用，然而其作用机制仍不清楚。本课题组前期通过生物信息学分析首次发现：该位点与另一3'UTR区位点(+1451C/T)呈强连锁，且它们所在区域为miRNA的结合位点，其多态性变化可以影响miRNA的结合能力。因此本研究以VEGF基因3'UTR区基因多态为研究对象，通过转染荧光素酶报告基因等方法，从人群流行病和细胞试验两个层面探讨VEGF基因表达与其3'UTR区基因多态性的关系；同时通过realtime-PCR技术，探索miRNA对VEGF基因表达调控的影响，以及该基因3'UTR区多态性在这一表达调控中的作用。本研究的进行不仅有助于揭示VEGF基因3'UTR区多态的分子机制，也为今后肺癌相关基因3'UTR区基因多态的功能研究提供新思路。

血管内皮生长因子（VEGF）是一种对血管生长有诱导作用的蛋白。最新研究证实VEGF基因3’非翻译区的+936C/T多态在非小细胞肺癌的易感性中发挥重要作用，然而其作用机制仍然不清楚。本课题组前期通过预测发现：该位点与另一3’UTR区位点（+1451C/T）呈强连锁，且它所在区域为miR-199a/b的结合位点，其多态性变化可以影响miRNA与其靶基因的结合能力。基于以上假设，本研究首先应用双荧光素酶报告基因在肺癌细胞株A549和肺上皮细胞株16HBE中证实mir-199可以明显降低T基因型VEGF基因的表达量，而对C基因型影响相对较小。其次本课题组应用SNaPshot技术对15例+1451C/T为杂合型的肺癌组织和远癌正常肺组织的等位基因差异表达（AEI）水平进行检测，也证实有27%的远癌正常肺组织存在明显的T等位基因型低表达，且这种AEI在癌组织中比例明显降低，从而提示该结果可能与癌组织中低表达miR-199a/b有关。除此之外，本研究还鉴定出一批在A549细胞和肺癌患者外周血细胞中异常表达的miRNA，为今后肺癌miRNA的相关功能研究奠定基础。