生殖细胞正常发生低温依赖性的分子机制

以家兔隐睾和未经冬眠蟾蜍的长足初级卵母细胞为实验模型，均发现较高的温度明显抑制初级精母细胞和初级卵母细胞ClnB1和p34基因的翻译。通过p13—和ClnB1抗体—Agarose亲和吸附，发现蟾蜍卵母细胞中有一种蛋白，表观分子量为28kDa，称为p28。其单抗注入卵内能抑制卵成熟。以p28单抗筛选到p28全长cDNA，其演绎分子量为24kDa。重组p28具明显的泛素羧基末端水争酶活性。亲和吸附实验表明：p28和ClnB1/p34等构成的复合体特异结合。蛋白印迹显示p28在脑和生殖腺中富集。未经冬眠和经冬眠卵中携带冷休克域的蛋白表达显示差异；已建立冬眠卵和未经冬眠卵的cDNA文库，为构建差减cDNA库、并进一步研究生殖细胞发生和成熟低温依赖性分子机制奠定基础。