子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜MicroRNA表达差异分析及应用研究

子宫内膜异位症（内异症）是育龄妇女的多发病、常见病，发病率保守估计达10%～15%。疼痛和不育是其最突出的症状，严重影响女性的生活质量，是世界范围的健康问题。其病因不明，临床表现多样，保守治疗不佳。目前对内异症发病机制信号调控过程的遗传基础了解很少。已知microRNA（miRNA）作为一种内源性的小分子非编码单链RNA，主要抑制信使RNA的转录功能，其调控基因众多，在各种重要生命过程中有关键作用,在内异症的病生理过程中扮演着十分重要的调控角色。至今不同病理类型内异症患者在位内膜和异位内膜表达差异的分析尚未见诸文献报道。本项目旨在通过比较正常人群与不同病理类型内异症患者在位内膜和异位内膜中miRNA的表达，建立内异症miRNA数据库，构建抑制miRNA治疗内异症的动物模型，从而探讨miRNA对于内异症发病机制、发生过程及病理分化的调节作用，为内异症的早期预防、诊断和治疗提供新方案和新思路。

子宫内膜异位症（EMS）是育龄期妇女的多发病，严重影响生活质量，是世界范围的健康问题。其病因不明，临床表现多样，保守治疗不佳。microRNA，是一类长约22个碱基的非编码小RNA。近年来研究发现 microRNA 参与EMS发病的多个环节。另一方面，microRNA 能够稳定存在于血浆或血清中，具备疾病分子生物标记物的某些优点，已在多种肿瘤和非肿瘤疾病的诊断和预后中显示了潜在的价值。随着生物信息技术的兴起及大数据时代的到来，文本挖掘已成为生物医学研究的基本方法之一，其在大规模获取原始数据、辅助疾病诊断、预防和新药开发方面已取得重要进展。我们首次利用基于PubMed的公共数据库，挖掘了183个EMS相关基因和54个EMS相关microRNA，构建了EMS相关蛋白-蛋白互作网络，发现VEGFA、RELA、MMP9和PCNA等关键节点基因及凋亡、细胞增殖和趋化作用等相关通路；采用Illumina测序技术，构建了卵巢型EMS患者的在位内膜和异位内膜microRNAs表达谱，发现了15个高表达丰度的差异表达microRNAs，RT-PCR证实miR-21、miR-125b-5p和miR-143-3p的表达异位内膜 >在位内膜；结合文本挖掘和microRNAs预测软件，构建了miR-21在EMS发病机制中的作用模型，发现miR-21可通过凋亡、局部粘连形成和JAK-STAT等通路参与EMS的发生；首次报道了血浆microRNA用于EMS的诊断，芯片法筛选出27个差异表达的血浆microRNAs，qRT-PCR验证发现血浆miR-17-5p, miR-20a 和miR-22在EMS患者中表达明显降低；同时发现EMS患者者术后3天的血浆miR-20a、miR-21及miR-26a与术前相比无明显变化；qRT-PCR发现miR-199a的表达在异位组织<在位内膜<正常内膜，构建过表达miR-199a在位子宫内膜间质细胞，发现其增殖、迁移、侵袭能力显著下降，同时HIF-1α与VEGF表达量下降，提示miR-199a介导的HIF-1α/VEGF通路参与在位内膜的异常侵袭、迁移和增殖；课题培养博士研究生5名，发表SCI论文4篇，研究成果获得首届《全国妇幼健康科学技术奖》一等奖。