PPARγ通过下调TLR4/Nox延缓慢性肾功能衰竭进展的作用研究

Chronic renal failure is the common pathway of various kidney diseases to ESRD. Previous studies of candidate indicated that ROS formation played an important role in the pathogenesis and development of CRF, Inhibition of ROS is helpful for attenuating the kidney injury, improving the prognosis. However, the specific regulatory mechanism remains elusive. It is proved that NADPH oxidase(Nox) is the primary source of ROS,Nox is the downstream target of PPARr,PPARγ can inhibit TLR-induced inflammation pathway. Hence, we speculate that PPARr can inhibit TLR4/Nox, regulating ROS formation and attenuating CRF progression. We aim to observe the influence of PPARr on CRF. We investigate the specific mechanism of PPARγ attenuating CRF progression and its complications , providing new therapeutic target for attenuating the progression of CRF.

慢性肾功能衰竭(CRF)是各类肾脏疾病通向终末期肾病（ESRD）的共同通路。项目申请人前期研究发现活性氧（ROS）在CRF发生、发展中发挥重要作用，抑制ROS生成有助于减轻肾损伤，改善预后，但是其在CRF发生、进展中的具体调控机制尚未明确。业已证实NADPH氧化酶(Nox)是ROS生成的主要来源，Nox亦被证实是Toll样受体（TLR4）的下游通路，而过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARr）激活能够抑制TLR4诱导的炎症通路。由此，我们推测：PPARr通过抑制TLR4/Nox调控ROS生成进而改善CRF。本课题拟通过基因敲除和过表达技术，观察PPARr对CRF的作用影响，并分别通过激活/抑制TLR4/Nox, 探讨PPARr延缓CRF进展及缓解相关并发症的具体机制，为临床防治CRF，延缓CRF进展提供新的靶点。

慢性肾功能衰竭是各种类型肾脏疾病进展到后期的共同临床表现，肾单位的大量破坏导致肾脏排泄功能与代谢功能的紊乱。氧化应激被认为参与了慢性肾功能衰竭的发生、发展。本课题主要围绕氧化应激在慢性肾功能衰竭中的具体调控通路以及可能机制，研究了PPARγ通过NOX调控氧化应激，进而延缓慢性肾功能衰竭进展的作用研究。.小鼠5/6肾脏切除手术后十二周成功构建肾衰模型。体外实验证实通过培养肾小管上皮细胞，予以促纤维化转化因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）刺激肾小管细胞发现纤维化因子collagen-I,collagen-III显著增高，同时ROS分泌明显增多，且两者呈明显正相关。予以ROS抑制剂预处理后发现，肾小管细胞凋亡率明显降低，且collagen-I,collagen-III表达量明显减少，提示抑制ROS表达有助于减轻肾脏纤维化。进一步的体内实验，通过5/6肾脏切除小鼠肾衰模型，予以ROS抑制剂喂养小鼠预处理， ROS抑制剂处理的肾衰小鼠较普通肾衰小鼠相比较，脾脏增大较小，血压增高较小，贫血指标亦有所改善，尿素氮，肌酐指标有所降低，血电解质指标未有明显差异，形态学HE染色小管损伤有所改善，结果进一步证实抑制ROS生成可以有效减轻肾脏纤维化损伤，同时改善贫血，高血压等伴随症状。.5/6肾脏切除小鼠肾衰模型予以PPARγ激活剂处理，发现ROS分泌量明显减少，肾纤维化指标collagen-I,collagen-III表达量明显减少，贫血指标，高血压症状亦有所改善，体外实验通过PPARγ激活剂预处理肾小管上皮细胞，TGF-β刺激发现：细胞ROS分泌量明显降低，纤维化指标collagen-I,collagen-III表达量显著降低。体外实验进一步证实PPARγ能够调控ROS表达，可能通过抑制ROS表达从而达到缓解肾脏损伤的作用。.体外实验予以肾小管上皮细胞下调PPARγ表达，予以TGF-β刺激，ROS生成量进一步升高，同时纤维化指标collagen-I,collagen-III表达量进一步增高，体内实验证实予以PPARγ抑制剂预处理的肾衰小鼠后发现：发现ROS分泌量进一步增高，肾纤维化指标collagen-I,collagen-III表达量进一步增高，贫血指标，高血压症状亦进一步加重。