8株具有显著肿瘤细胞抑制活性内生真菌中新颖结构活性化合物的发现研究

In our previous study, we have isolate, purify and identified 80 strains of endophytic fungi from toxic plant Lysidice rhodostegia. Bioassay data showed that 8 out of the 80 strains significantly inhibited the growth of tumor cells. From one endophytic fungus, penicillium dangeardii, three compounds with unprecedented skeletons and three bioactive compounds were discovered. Based on above results, we will continue the program to discover novel compounds with antitumor bioactivities from the remaining eight strains of endophytic fungi. In the study, gene screening, bioassay and chemical screening will be utilized collectively to improve the discovery rate and efficiency of bioactive substance with novel structures. The objective is to acquire 150-200 compounds including 2-3 leading compounds with antitumor activity and 4-6 target molecules with unique structure for biosynthesis.

本项目前期对80株有毒药用植物仪花的内生真菌进行了抗肿瘤活性筛选，发现9株内生真菌具有显著的肿瘤细胞抑制活性（IC50：0.03-10 μg/mL），并从1株强活性内生真菌（青霉菌Penicilliuim dangeardii）中发现了3个新颖骨架结构的螺环酸酐类化合物和2个nonadrides型酸酐类化合物。其中1个化合物具有显著肿瘤细胞抑制活性，2个化合物具有显著的抗炎活性（μM水平）。在此基础上，本项目拟继续进行其余8株强活性内生真菌中新颖结构活性化合物的研究。采用基因筛选、活性筛选和化学筛选集成应用的新研究策略，即：基因筛选预测真菌代谢产物可能的结构类型，活性筛选和化学筛选集成应用识别、锁定活性部位和组分中可能的新颖结构化合物，并应用现代色谱技术定向地获取它们。通过化合物的体内外抗肿瘤活性评价，发现新颖结构活性化合物30-40个，并优选出2-3个具有研发前景的新型抗肿瘤先导化合物。

有毒药用植物内生真菌可能为增强适应性和拮抗宿主毒性而产生新颖独特的次级代谢产物。因此，在本项目的支持下我们开展了9株有毒药用植物内生真菌中新颖结构活性化合物的发现研究，从踝节菌T. purpurpgenus，黄曲霉菌A. flavus，间座壳菌D. pseudomangiferaea，围小壳丛菌G. cingulata、球座菌G. mangiferae等内生真菌中获得了273个化合物，其中68个新结构化合物和33个具有细胞毒、肝保护、抗肺纤维化、抗神经炎等活性化合物。活性成分包括：从踝节菌中发现1个化合物具有抑制LPS诱导BV2细胞NO生成抑制活性，1个化合物具有抑制抑制XOD酶的活性，2个化合物具有PTP1b的抑制活性。从A. flavus中发现2个化合物对人结直肠癌细胞HCT-116等肿瘤细胞具有显著活性，3个化合物具有显著的肝保护活性。从间坐壳中发现5个化合物具有抗肺纤维化活性，从围小壳丛菌和球座菌中发现了8个化合物具有抑制小胶质细胞诱导的NO生成的活性。这些活性成分的发现为基于天然产物活性物质的创新药物研究奠定了基础。以上成果发表论文7篇，其中SCI论文5篇，获授权专利2项，培养研究生4名。