TNF基因免疫脂质体在体转基因治疗大鼠肝癌的实验研究

本研究选用阳离子脂质体作为DNA传递载体，选择TNFαcDNA作为治疗基因，采取阳离子-TNFα基因复合物进行体外转导肝癌细胞，体内直接瘤内注射。经RT-PCR法、生物法检测转导后的肝癌细胞中确有TNFα基因转录和表达。体外转导肝癌细胞，12-120小时后细胞上清液可测得TNFα一过性达表，其表达效率与脂质体和基因比例密切相关。在体外通过MTT法检测表明TNFα基困转导后所表达的TNFα量能对靶细胞产生有效的杀伤、抑制作用；在体内经TNFα基因转导的肿瘤生长明显比未处理的慢。经流式细胞仪、电镜、TdT法等进行细胞DNA周期分析和细胞凋亡检测，表明表达的TNFα通过抑制细胞增殖与分裂、诱导凋亡和直接细胞毒作用三条途径来，达到对靶细胞的杀伤、抑制作用。