转基因胎肝基质细胞诱导双重标记的人胚胎干细胞向肝细胞分化

肝非实质细胞及其产生的粘附分子、胞外基质与因子在肝脏发育分化过程中起着至关重要的作用，这启发我们利用肝非实质细胞作为饲养层提供发育微环境，促进人胚胎干细胞向肝系的分化与成熟，实现成熟功能肝细胞为种子细胞的细胞移植与生物人工肝。本项目通过诱导荧光素酶和荧光蛋白双重标记（pSicoR-Alb-hrl-mrfp）的人胚胎干细胞向"定型内胚层"分化，实现这一肝发育分化关键阶段的高度富集，再以高效、稳定表达分泌型酸性成纤维细胞生长因子（bFGF）的胎肝基质细胞FLSCs/bFGF作为饲养层，利用bFGF启动肝芽发生和胎肝基质细胞提供的特殊微环境，进一步促进其向肝系分化，通过流式分选获得纯化的成熟功能肝细胞，移植后观测活体动物体内细胞的走向、分布与功能重建。这一研究不仅为深入探讨肝脏发育分化调控机制提供重要的理论依据，也为人胚胎干细胞在肝再生医学中应用提供技术上的支持，具有重要理论意义和广阔应用前景。

肝非实质细胞及其产生的粘附分子、胞外基质与因子在肝脏发育分化过程中起着至关重要的作用，这启发我们利用肝非实质细胞作为饲养层提供发育微环境，促进人胚胎干细胞向肝系的分化与成熟，实现成熟功能肝细胞为种子细胞的细胞移植与生物人工肝。在该青年科学基金项目中，我们首先将人胚胎干细胞向“定型内胚层”分化，实现了这一肝发育分化关键阶段的高度富集，再以高效、稳定表达碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的胎肝基质细胞FLSCs/bFGF作为饲养层，进一步促进了其向肝系分化，并建立了通过荧光素酶和荧光蛋白双重标记的纯化、示踪方法。这一研究不仅为深入探讨肝脏发育分化调控机制提供重要的理论依据，也为细胞移植、生物人工肝、微囊肝、组织工程肝脏等治疗重症肝衰竭奠定基础，具有重要理论意义和广阔应用前景。基于此项目，我们已经分别在Tissue Engineering Part C and Prog Biochem Biophys上发表两篇文章、一项专利获得授权，编写两部专著（含一部外文）。